الگوي بيان آنزيم هاي مؤثر در كنترل زيستي به وسيله برخي جدايه هاي وحشي و جهش يافته قارچ Trichoderma viride

A study of enzymes expression pattern involved in biologic control by some wild and mutant strains of Trichoderma viride

اين پژوهش با هدف ايجاد جهش در قارچ Trichoderma virideبه وسيله پرتو گاما و سپس بررسي افزايش يا كاهش بيان آنزيم‌هاي سلولاز و كيتيناز در جدايه­ هاي جهش­ يافته نسبت به جدايه وحشي صورت گرفت. القاي جهش با دز بهينه 250 گري و با استفاده از پرتوگاما انجام شد. پروفايل پروتئيني آنزيم­هاي توليد شده كليه جدايه­ ها با آزمون الكتروفورز SDS-PAGE مورد بررسي قرار گرفت. در نهايت الگوي پروتئوم گونه T. virideبه همراه جدايه جهش­يافته Tv M21 با سوبستراي كيتين كلوئيدي با تكنيك الكتروفورز دوبعدي و نرم­افزار ImageMaster 2D Platinum ارزيابي شد. بيشترين تنوع در توليد آنزيم­هاي سلولازي در جدايه­هاي جهش­يافته نسبت به جدايه وحشي در Tv M21، Tv M10، Tv M16 و Tv M14 و بيشترين تنوع در توليد آنزيم­ هاي كيتينازي در جدايه­هاي جهش­يافته نسبت به جدايه وحشي در Tv M21، Tv M1 و Tv M4 مشاهده شد. الگوي پروتئوم نشان داد، لكه ­هاي پروتئيني جدايه­ هاي جهش ­يافته در مقايسه با جدايه­ هاي وحشي به‌صورت كمي و كيفي متفاوت هستند. نتايج نشان داد، اشعه گاما مي‌تواند تغيير در ميزان توليد آنزيم ­هاي خارج سلولي و فعاليت آن­ها را سبب شود. اين موضوع مي­تواند در مديريت بيماري­هاي گياهي و بهره ­وري صنعتي از آنزيم­ هاي مورد مطالعه مد نظر قرار گيرد.

This study was carried out to create mutations in the fungus Trichoderma viride by gamma radiation (the optimal dose of 250 Gy) and then to check the increase or decrease in expression of the cellulase and chitinase enzymes in the mutant strains with respect to the wild isolates. Protein profiles were analyzed by SDS-PAGE electrophoresis. Finally, proteome pattern of mutant strains Tv M21 of T. viride was evaluated by colloidal chitin substrate and two-dimensional electrophoresis techniques and software ImageMaster 2D Platinum. Highest variability of cellulase enzyme production was observed in the mutant strain wild isolates in the Tv M21, Tv M10, Tv M16 and Tv M14 and the highest diversity in the production of chitinase enzyme in the mutant strain in the wild isolates Tv M21, Tv M4 and Tv M1, respectively. Proteomic pattern revealed that the protein spots of mutant strains in comparison to wild isolates were both quantitatively and qualitatively different. This finding demonstrates that mutations can lead to changes in patterns of secreted proteins, so that may improve the control potential of plant disease.