اثر مانيتول بر رشد رويان‌هاي‌ بدني توليد شده از پينه رويان‌زاي ميخك (Dianthus caryophyllus L)

Effect of Mannitol on Growth of Embryogenic Callus-Derived Somatic Embryos of Carnation Dianthus Caryophyllus L

شرايط لازم براي باززايي مطلوب چهار رقم ميخك (Nelson ،Impulse ،Sagres و Spirit) به روش رويان‌زايي بدني بررسي شد. بدين منظور محيط كشت (موراشيگ و اسكوگ) داراي 30 گرم در ليتر سوكروز، 2 ميلي‌گرم در ليتر 2,4-D و 0/2 ميلي‌گرم در ليتر BA براي‌‌ايجاد كالوس رويان‌زا استفاده شد. رويان‌هاي بدني زماني به‌دست آمد كه پينه‌هاي رويان‌زا به محيط كشتMS فاقد تنظيم كننده رشد و داراي 30 گرم در ليتر سوكروز به تنهائي و يا همراه با غلظت‌هاي مختلف مانيتول (15، 30، 60، 90، 120 و 150 گرم در ليتر) انتقال يافتند. در محيط كشت حاوي مانيتول بدون سوكروز رويان سوماتيكي ايجاد نشد. با افزودن مانيتول به محيط كشت،‌‌ايجاد رويان‌هاي بدني روي پينه‌هاي رويان‌زا به ميزان قابل توجهي افزايش يافت. رويان‌هاي‌‌ايجاد شده بر روي محيط‌هاي كشت حاوي غلظت‌هاي بالاي مانيتول (60، 90، 120 و 150 گرم در ليتر) به طور نرمال توسعه يافتند. رويان‌هاي بدني به محيط كشت 1/2 MS حاوي 30 گرم در ليتر سوكروز انتقال داده شدند و حدود 95% از آنها به صورت گياهچه كامل باززا گرديدند. گياهچه‌هاي به‌دست آمده در شرايط گلخانه نيز به طور عادي مراحل رشد خود را ادامه دادند.

In vitro regeneration of four cultivars of carnation namely ‘Nelson’, ‘Impulse’, ‘Sagres’ and ‘Spitit’ through somatic embryogenesis was studied. MS culture medium was supplemented with 30 gl-1 sucrose, 2 mgl-1 2,4-D and 0.2 mgl-1 BA and used for embryogenic callus formation. Somatic embryos were formed when embryogenic callus was transferred to MS medium without growth regulators containing 30 g/l-1 sucrose alone or supplemented with different concentrations of mannitol (15, 30, 60, 90, 120 and 150 gl-1). No somatic embryo was formed on culture media containing mannitol without sucrose. Number of somatic embryos produced from embryogenic calli significantly increased by adding mannitol to the culture media. Normal embryos formed on culture media containing high concentrations of mannitol (60, 90, 120 and 150 gl-1) developed normally. About 95% of somatic embryos transferred to the1/2 MS culture medium containing 30 gl-1 sucrose, germinated into plantlets. Plantlets also continued their growth under greenhouse conditions.