بررسي اثر ضدقارچي اسانس چهار گياه دارويي، آناليز و شناسايي ملكولي باكتري آنتاگونيست عليه قارچ عامل پوسيدگي بعد از برداشت پرتقال Penicillium digitatum

Evaluation and comparison of the antifungal effect of essential oil of four medicinal plants and molecular identification antagonistic bacteria against fungi decay cause of orange post-harvest by Penicillium digitatum

كپك سبز مركبات Penicillium digitatumازمهمترين بيماري‌هاي بعد از برداشت مي‌باشد. به كارگيري مداوم سموم شيميايي تاثير ماندگار روي سلامتي انسان و آلودگي محيط زيست دارد و سبب بروز مقاومت در سويه‌هاي بيماريزا ميگردد. در اين تحقيق فعاليت ضدقارچي غلظت‌هاي مختلف (100، 200، 300 و 400 پي‌پي‌ام) اسانس چهار گياه دارويي آويشن شيرازي (Thymus vulgaris)، آلوورا (Aloe vera)، سير (Allium sativum) و زيره سبز (Cuminum cyminum) جمع‌آوري شده از منطقه قرق استان گلستان مورد بررسي قرار گرفت. اسانس‌ها با استفاده از روش تقطير؛ بخار آب و با استفاده از دستگاه كلونجر تهيه و سپس مهمترين مواد موثره اسانسي كه بيشترين عملكرد آنتاگونيستي را داشتند توسط دستگاه GC/MS آناليز گرديد. همچنين فعاليت آنتاگونيستي باكتري‌هاي جداسازي شده از اپيفيت پرتقال شامل sp. Bacillus، Pseudomonassp.، Streptomycess sp. عليه قارچ پني سيليوم در قالب طرح فاكتوريل مورد بررسي قرار گرفت. بيشترين درصد ممانعت كنندگي (95/99 درصد)، توسط اسانس آويشن عليه پني سيليوم در غلظت 400 پيپيام مشاهده گرديد. آناليز رگرسيوني تاثير اسانس‌ها نشان داد با افزايش غلظت اسانس درصد بازدارندگي آن روي قارچ افزايش مي‌يابد. بر اساس نتايج به دست آمده، اسانس آويشن با داشتن مهمترين تركيبات موثره در اسانس‌ها (كارواكرول - 5/45 درصد)، آلفا- ترپينئول (-9/22 درصد) و اندو- بورنئول (3/14 درصد) بيشترين فعاليت ممانعت كنندگي (3/22 ميلي‌متر) را عليه پني سيليوم از خود نشان داد. در بين 23 جدايه باكتريايي، يك جدايه به نام H7 بيشترين فعاليت ممانعت كنندگي را عليه قارچ داشت. با استفاده از PCR و تعيين توالي DNA ژنوم 16S rRNA، H7 به‌عنوان Bacillus cereus شناسايي گرديد. بنابراين اسانس آويشن و جدايه (Bacillus cereus (H7 جايگزين‌هاي مناسبي براي كنترل شيميايي پوسيدگي بعد از برداشت پرتقال مي باشند.

Citrus green mold, Penicillium digitatum is one of the most important postharvest diseases. Continuous application of chemical pesticides has serious long term effects on human health and environmental pollution that may result in emergence of resistance in pathogenic strains. In this study, antifungal activity of different concentrations (100, 200, 300, 400ppm) of four medicine plants essences including Thymus vulgaris, Cuminum cyminum,Allium sativum and Aloe vera collected from Ghorogh area of Golestan provience was evaluated. Essences were prepared by the steam distillation water using Clevenger apparatus. The main constituents' essences having the most antagonistic activity were analyzed by GC / MS. Antagonistic activity of bacteria isolated from orange epithelium including Bacillus, Pseudomonas sp., and Streptomyces sp. against Penicillium digitatum was also investigated in a completely randomized factorial model. The maximum percent inhibition (99.95%) was observed by the thyme plant essence at 400 ppm concentration. Regression analysis of the effects of essences showed that by increasing the essences concentration, its inhibitory effect on fungi increased. Based on the results, thyme essence with having the important constituents of essences (carvacrol - 45.5%), (alpha-terpineol - 22.9%) and (endo - borneol 14.3%) had the highest inhibitory effect (22.3 mmol) against penicillium. Among 23 bacterial isolates, one of them, H7, had the highest inhibitory effect on penicillium. Using PCR amplification and DNA sequencing of 16S rRNA gene, it was identified as Bacillus cereus. Thus, thyme essence and Bacillus cereus (H7) are an appropriate substitutions to chemical control of orange postharvest diseases caused by Penicillium digitatum.