غربالگري جدايه‌هاي هالوتولرانت مقاوم به فلزات سنگين و توليد كننده پپتيدهاي غير ريبوزومي

Screening heavy metal resistant halotolerant strains producing non-ribosomal peptides

امروزه، بشر براي حل مشكلات صنايع دارويي، غذايي و شيميايي، به سمت طبيعت و تركيبات فعال زيستي روي آورده است. از جمله منابع اين تركيبات، متابوليت هاي ثانويه ي توليد شده توسط ميكرو ارگانيسم هايي است كه از مناطق بسيار سخت جداسازي شده اند. هدف از اين مطالعه، بررسي سويه‌هاي هالوتولرانت جدا شده از درياچه حاج‌علي‌قلي‌خان با قابليت‌هاي توليد متابوليت‌هاي ثانويه است. ميكرو ارگانيسمهاي نمك دوست و تحمل كننده نمك مقاوم به نيكل، كادميم، مس و كبالت از درياچه حاج علي قلي خان جدا شدند. توانايي ژنتيكي اين جدايه ها براي توليد متابوليتهاي ثانويه، با استفاده از تكثير ژن‌هاي nrpS با آغازگرهاي اختصاصي NS1/NS2، A3/A7 ارزيابي گرديد. از غربالگري ميكروارگانيسمهاي درياچه نمك به ترتيب 13% ، 5/19% ، 43/75 % و 7/3 % جدايه ها از محيط هاي كشت MGM، MH ، SWN LNSWN و 20/62 % از جدايه ها از محيط بدون نمك نوترينت آگار بدست آمد. سنجش مقاومت به فلزات در جدايه هاي غربال شده از درياچه نشان داد كه بيشترين فراواني جدايه‌ها در مقاومت به نيكل و حساسيت به فلز كادميم است. نتايج تكثير ژن‌هاي nrpS در جدايه هاي هالوتولرانت مقاوم به فلزات با دو جفت آغازگرهاي اختصاصي 3 تا 7 قطعه DNA را نشان داد. حضور ژن nrpS در بين ميكروارگانيسمهاي نمك دوست نسبي و تحمل كننده نمك، ارتباط مستقيم بين مقاومت به فلزات سنگين و توانايي ژنتيكي توليد متابوليت‌هاي ثانويه را نشان مي دهد.

Todays, secondary metabolites from microorganisms have been used to improve food, pharmaceutical and chemical industries. Extremophile microorganisms are one of the resources for the secondary metabolites. The heavy metal resistant halotolerants were isolated from Haj AliGholi Khan Salt Lake. The potential of the isolates for producing secondary metabolites were molecularly investigated by amplification of nrpS genes with specific primers A3/A7 and NS1/NS2. In the screening of Haj AliGholi Khan Lake microorganisms; 13% of isolates from MGM, 19.5% from MH, 43.75% from SWN, 3.7% from LNSWN and 20.62% from normal Nutrient agar were obtained. The halotolerants were highly resistant against Ni and highly susceptible to Cd. Three to 7 PCR products were identified from optimized PCR reaction of nrpS genes of heavy metal resistant halotolerant with specific primers. Existence of nrpS genes among halotolerant and semi- halophile microorganisms from Haj AliGholi Khan Salt Lake revealed a direct relation between heavy metal resistance and genetic potential for producing secondary metabolites.