اثر استرس شوري در بيان ژن Na/KATPase در دو جمعيت مختلف آرتميا Artemia franciscana و Parthenogenetic Artemia با تكنيك RT-PCR-DGGE

Effect of salinity stress on the gene expression of Na/K ATPase on two Artemia populations (Artemia franciscana and Parthenogenetic Artemia) by RT-PCR-DGGE

آرتميا يكي از انواع سخت پوستان است كه شوري‌هاي بسيار بالا را تحمل مي كند. به واسطه‌ي تغييرات اقليمي و بالا رفتن شوري منابع آب‌هاي داخلي و تالاب ها و همچنين اهميت آرتميا به عنوان يكي از فاكتورهاي مهم در امر پرورش و تغذيه لارو ماهي و ميگو، بررسي ويژگي‌هاي مولكولي جمعيت‌هاي مختلف آرتميا ضروري به نظر مي‌رسد. مطالعه حاضر با هدف تاثير استرس شوري بر روي بيان ژن Na+/K+ATPase در اگزون شماره 7 دو جمعيت مختلف آرتميا با استفاده از توسط تكنيك RT-PCR-DGGE انجام شد. در اين تحقيق ابتدا 2 جمعيت از آرتمياهاي گونه Artemia franciscana و Parthenogenetic Artemia در شوري‌هاي 60، 120 و 180 گرم در ليتر پرورش داده شد. در انتهاي دوره mRNA ژن Na+/K ATPase تهيه و پس از توليد cDNA، تصوير آن با استفاده از تكنيك DGGE بررسي و همچنين باندهاي ايجاد شده توالي‌يابي شدند. نتايج اين بررسي نشان داد محصول توليد شده از اين ژن در A. franciscana هموزيگوت، در حالي‌كه در Parthenogenetic Artemia هتروزيگوت كه حاصل دو الل است. همچنين در Parthenogenetic Artemia حاصل ترجمه پروتئيني كه از دو آلل مختلف حاصل شده است. جالب اينكه بر اساس نتايج اين مطالعه، هيچ تفاوتي در نمونه‌هاي مورد بررسي در شوري‌هاي مختلف مشاهده نشد و ظاهراً تنها اختلاف موجود در ژنوم اين جمعيت‌ها مي‌باشد.

Artemia is One of types of crustacean that can withstand in very high salinity. Due to the climate changes and increasing the salinity of inland waters and importance of Artemia as a main food sources for crustacean and marine fish larvae as well, it is necessary to understand the molecular mechanisms of biological processes in different populations of Artemia. The current study, investigates the effects of salinity stress on Na+/ K ATPase gene expression in exon 7 of two Artemia population with using of RTRCR- DGGE. Two different populations of Artemia franciscana and Parthenogenetic Artemia were reared at salinities 60, 120 and 180 mg/l. At the end of the experiment the mRNA of Na+/ K ATPase was provided and converted to cDNA. Subsequent DGGE and sequencing analyses revealed that the products of these genes in A. franciscana is homozygous while in Parthenogenetic Artemia is heterozygous which is produced by two alleles. Also it was found that in the Parthenogenetic Artemia protein translation and the production of two different alleles is obtained. Interestingly, no difference was observed in the samples studied and apparently the only difference can be related to genomic variation among these populations.