شناسايي و تايپينگ استافيلوكوكوس اورئوس جداشده از موارد ورم پستان باليني گاوي در شهرستان سنندج بر اساس آناليز PCR-RFLPژن aroA

Identification and Typing of Staphylococcus aureus Isolated from Clinical Bovine Mastitis in Sanandaj City Using PCR-RFLP Analysis of the aroA Gene

استافيلوكوكوس اورئوس يكي از مهم‌ترين عوامل ايجادكننده ورم پستان عفوني در دام‌هاي اهلي است. به دليل وجود سويه‌هاي متعدد استافيلوكوكوس اورئوس و تفاوت‌هاي سويه‌اي در بازآرايي آلل‌هاي كروموزمي، روش‌هاي ژنوتايپينگ متفاوتي همچون آناليز DNA كروموزمي توسط هضم آنزيمي به منظور تايپينگ ژنتيكي باكتري معرفي شده‌اند. در بررسي حاضر، براي اولين بار تنوع ژنتيكي سويه‌هاي استافيلوكوكوس اورئوس جدا شده از موارد ورم پستان باليني گاوي در شهرستان سنندج بر اساس آناليز PCR-RFLP ژن aroA ارزيابي گرديد. در اين تحقيق تعداد 120 نمونه شير ورم پستان گاوي به روش استريل جمع‌آوري و بررسي گرديد. استافيلوكوكوس اورئوس جدا شده به روش كشت و آزمايشات روتين باكتريولوژيكي، با روش PCR مبتني بر ژن aroA آناليز شد. قطعه حاصل از تكثير با اندازه 1153 جفت باز توسط آنزيم تعيين حدودي TaqI هضم و قطعات ايجاد شده الكتروفورز شدند. 28 سويه استافيلوكوكوس اورئوس در روش فنوتيپي جداسازي و قطعه مورد نظر در تمام جدايه‌ها مشاهده شد. در هضم آنزيمي، دو نوع الگوي هضم قابل نام‌گذاري براساس مطالعات قبلي ايجاد شد. ژنوتيپ B در 23 مورد (82 درصد) و ژنوتيپ N در پنج مورد (18 درصد) شناسايي شد. نتايج نشان مي‌دهند كه استافيلوكوكوس اورئوس در ايجاد ورم پستان باليني در سنندج دخيل بوده و عليرغم وجود ژنوتيپ‌هاي محدود، تنوع سويه‌اي در جدايه‌هاي اين باكتري در منطقه وجود دارد. عدم شناسايي ژنوتيپ جهاني A و نيز ژنوتيپ اختصاصي باكتري در سنندج، براي اولين بار گزارش مي‌شود.

Staphylococcus aureus is one of the most important causes of contagious mastitis in domestic animals. Due to the existence of multiple strains of S. aureus and strain variations in chromosomal allelic rearrangement, different genotyping methods, such as analysis of the chromosomal DNA following the enzymatic digestion, are introduced for genetic typing of the bacterium. In the present survey, for the first time, the genetic diversity of S. aureus recovered from clinical bovine mastitis in Sanandaj was investigated based on PCR-RFLP analysis of the aroA gene. 120 bovine mastitic milk samples were collected aseptically and assessed. S. aureus isolated in culture and routine bacteriological methods were analyzed by aroA gene-based PCR. The amplicons with a size of 1153bp were digested with TaqI restriction enzyme and the fragments were electrophoresed. 28 S. aureus strains were isolated in phenotypic method among which the expected amplicon was observed in all of them. In enzymatic digestion, two RFLP patterns, nomenclatural based on the previous studies were generated. Genotype B was detected in 23 (82.14%) isolates and genotype N in 5 isolates (17.85%). The results demonstrate that S. aureus is involved in bovine mastitis in Sanandaj and despite the presence of limited genotypes, strain variation of this bacterium exist in the region. The presence of genotype B in all farms implies the same source of infection among farms, which should be considered in control programs of mastitis. Nondetection of universal genotype A and specific genotype of the bacterium in Sanandaj is reported for the first time.