بررسي جايگاه كروموزومي HindIII Satellite DNA در تاس‌ماهي ايراني Acipenser persicus و تاس‌ماهي روسي Acipenser gueldenstaedtii با شيوه دو رگه‌گيري فلورسان درجا (FISH)

Chromosomal location of HindIII Satellite DNA in Acipenser persicus and Acipenser gueldenstaedtii by using of fluorescent in situ hybridization (FISH)

در اين پژوهش يك DNA ماهواره‌اي (bp168) از خانواده HindIII Satellite DNA، از تاس‌ماهي روسي جدا و به عنوان پروب براي انجام دو رگه‌گيري فلورسان درجا (FISH) با كروموزوم‌هاي تاس‌ماهي ايراني و تاس ­ماهي روسي استفاده شد. پس از تهيه گسترش‌هاي كروموزومي مناسب با روش كشت لكوسيت‌هاي خون و نشاندار كردن پروب با رنگ Orange-dUTP) Spectrum Orange) به روش Nick Translation، دو رگه‌گيري پروب با كروموزوم ­ها بر روي لام انجام شد. در گسترش‌هاي كروموزومي بررسي شده نقاط دو رگه (نقاط رنگي) به وضوح قابل رويت بود. با شمارش نقاط رنگي توليد شده در 12 گسترش كروموزومي متعلق به سه عدد ماهي از هر گونه، ميانگين تعداد نقاط رنگي موجود در گسترش‌هاي كروموزومي تاس‌ماهي ايراني و تاس‌ماهي روسي به ترتيب 3±67 و 4±68 تعيين شد. در مطالعه حاضر تعيين دقيق نوع كروموزوم‌ها و محل قرارگرفتن HindIII SatDNA بر روي كروموزوم‌ها احتمالا به علت وجود ميكروكروموزوم‌ها و ناهمگن بودن شكل و اندازه نقاط رنگي توليد شده، غيرممكن بود.

In this study, a HindIII Satellite DNA (168bp) was isolated from Russian sturgeon, Acipenser gueldenstaedtii and was used as a probe for fluorescent in situ hybridization (FISH) with the chromosomes of Persian sturgeon, Acipenser persicus and Russian sturgeon. After obtaining suitable chromosomal preparations from the fishes through leukocyte culture and labeling the probe with Spectrum orange (Orange-dUTP) through Nick translation method, the probe was hybridized with chromosomes of the fishes on the microscopic slide. In the studied chromosomal preparations, the hybridization colored signals were clearly visible. Counting the produced signals in twelve chromosomal preparations of three fishes from each species showed that the mean number of the signals in the chromosomal preparations of the Persian sturgeon and Russian sturgeon were 66±4 and 68±3 respectively. In this study, accurate kind determining of chromosomes and HindIII SatDNA site on the chromosomes were impossible due to the presence of microchromosomes and heterogeneity of shapes and sizes of colored signals.