روش تك‌مرحله‌اي براي كونژوگاسيون آنتي‌بادي‌ها با كوانتوم‌دات كادميوم‌تلوريد با استفاده از دكستران فعال

One-step Conjugation Method for Antibodies with CdTe Quantum Dots Using Activated Dextran

اهداف: استفاده از نانوذرات نقاط كوانتومي نيمه هادي (qd) با طيف نشري در محدوده مرئي به عنوان نشانگر در روش هاي ايمونواسي، امكان شناسايي عامل مورد نظر را بدون نياز به تجهيزات خيلي پيشرفته به كاربر مي دهد. بر همين اساس، هدف پژوهش، ارايه روش تك مرحله اي براي كونژوگاسيون آنتي بادي ها با كوانتوم دات كادميوم تلوريد با استفاده از دكستران فعال بود.مواد و روش ها: در اين پژوهش تجربي، نانوذرات كادميوم تلوريد (cdte)، سنتز و از ميكروسكوپ الكتروني عبوري براي بررسي مورفولوژي نقاط كوانتومي cdte سنتزشده استفاده و اندازه، غلظت و پايداري نانوذرات سنتزشده ارزيابي شد. به منظور پايدارنمودن نانوذرات سنتزشده با استفاده از bsa (آلبومين سرم گاوي)، پوشش داده و با دكستران فعال به آنتي بادي ها متصل شدند. براي ارزيابي آنتي بادي هاي كونژوگه از آزمون هاي لكه گذاري ايمني استفاده شد.يافته ها: نقطه اي و كروي بودن مورفولوژي نانوذرات كاملاً مشهود بود. اختلاف جابه جايي qd و dbsa-qd از روي ژل آگارز، تاييدكننده تشكيل dbsa-qd بود و طيف نشري رقت هاي يكسان از نانوذرات در حضور و عدم حضور bsa به دست آمد. اتصال با dbsa علاوه بر باقي ماندن و بهترشدن خصوصيات نشري نانوذره، باعث به وجودآمدن گروه هاي عاملي متنوع براي مراحل بعدي اتصال نانوذرات شد. نشر فلوئورسانسي نانوذرات در هر دو حالت پوشش دار با dbsa و كونژوگه با آنتي بادي از نانوذرات آزاد بيشتر بود. با استفاده از آنتي بادي هاي متصل شده به نانوذرات، حد تشخيص 30نانوگرم براي آنتي ژن پروتئيني به صورت چشمي به دست آمد.نتيجه گيري: در فرآيند كونژوگاسيون به منظور اتصال نقاط كوانتومي cdte به آنتي بادي ها از طريق دكستران، با پوشاندن سطح نانوذرات با bsa دناتوره شده علاوه بر افزايش پايداري نانوذرات، گروه هاي عاملي جديدي روي سطح نانوذره به وجود مي آيد.

Aims The use of semiconductor quantum dots (QD) nanoparticles with emission spectrum in the visible region as a marker in immunoassays provides the user with an opportunity to detect the desired agent without using advanced equipment. Accordingly, the aim of this study was to present a one-step conjugation method for antibodies with CdTe quantum dots, using activated dextran. Materials & Methods In this experimental study, CdTe nanoparticles were synthesized and the transmission electron microscope was used to study the morphology of the synthesized QD of CdTe and the size, concentration, and stability of the synthesized nanoparticles were evaluated. In order to stabilize the nanoparticles synthesized by BSA (Bovine Serum Albumin), they were coated and connected to antibodies with activated dextran. Immunosuppression tests were used to evaluate the conjugated antibodies. Findings Spot and spherical nature were completely evident in the morphology of nanoparticles. The difference in QD and dBSA-QD displacement from the agarose gel confirmed the formation of dBSA-QD and the same dilution spectrum from nanoparticles was obtained in the presence and absence of BSA. Connecting with dBSA, in addition to maintaining and improving the properties of the nanoparticle’s diffusion led to the creation of diverse functional groups for the next steps of nanoparticle connection. The fluorescence emission of nanoparticles was higher in both coated with dBSA and conjugated with antibodies than free nanoparticles. By using antibodies connected to nanoparticles, the detection limit of 30ng for protein antigen was obtained as an eye. Conclusion In the conjugation process, in order to connect CdTe quantum dots to antibodies via dextran, by coating nanoparticles with a denatured BSA in addition to increasing the stability of nanoparticles, new functional groups are created on the surface of the nanoparticle.