بررسي پتانسيل پروبيوتيكي باكتري‌هاي اسيدلاكتيك جداسازي شده از روده ماهي قزل‌آلاي رنگين‌كمان (Oncorhynchus mykiss Walbaum) عليه باكتري Streptococcus iniae

Evaluation of the probiotic potential of lactic acid bacteria isolated from rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) intestine against Streptococcus iniae

در اين مطالعه، پتانسيل پروبيوتيكي باكتري‌هاي اسيد‌لاكتيك جدا‌سازي شده از روده ماهي قزل‌آلاي رنگين‌كمان (Oncorhynchus mykiss ) با هدف مهار باكتري Streptococcus iniae توسط آزمايش­ هاي in vitro ارزيابي گرديد. بدين منظور، جدايه‌هاي باكتريايي اسيدلاكتيك گرم مثبت و كاتالاز منفي از نظر ويژگي­ هاي پروبيوتيكي از قبيل مقاومت به اسيد و املاح صفراوي، فعاليت ضدميكروبي عليه باكتري S. iniae و ارزيابي‌هاي ايمني زيستي شامل فعاليت هموليتيك و حساسيت نسبت به هشت آنتي‌بيوتيك‌ تجاري عمده غربال شدند. در انتها، به­ منظور شناسايي ژنوتيپي جدايه‌هاي باكتريايي اسيد‌لاكتيك منتخب از آناليز توالي ژني 16S rRNA بهره گرفته شد. براساس نتايج، از ميان 148 جدايه باكتريايي، 5 سويه باكتريايي اسيدلاكتيك داراي ويژگي‌هاي پروبيوتيكي مورد نظر بودند. تمامي اين سويه‌ها به زيرگونه‌هايي از Lactococcus lactis تعلق داشته و داراي ويژگي‌هايي از قبيل مقاومت نسبت به 7/5-3=pH و املاح صفراوي ماهي (10 درصد) و فعاليت ضدميكروبي عليه باكتري S. iniae بودند. همچنين ارزيابي ايمني زيستي نشان داد كه هيچ­ كدام از باكتري‌ها فعاليت بتاهموليتيك نداشته و تمامي 5 سويه باكتريايي منتخب، داراي مقاومت فنوتيپي نسبت به آنتي­بيوتيك تتراسايكلين بودند. مقاومت آنتي‌بيوتيكي چندگانه (تتراسايكلين و كلرامفنيكل) تنها درL. lactis NABRII61 مشاهده شد. اين مطالعه نشان‌ داد كه 5 باكتري‌ اسيدلاكتيك جداسازي شده از فلور ميكروبي روده ماهي قزل‌آلاي رنگين‌كمان مي‌توانند به­ عنوان سويه‌هاي پروبيوتيك در آبزي‌پروري در نظر گرفته شوند. با اين حال، تعيين ماهيت مقاومت آنتي‌بيوتيكي نيازمند مطالعات بيشتري مي‌باشد.

In this study, the probiotic potential of lactic acid bacteria isolated from rainbow trout intestine with inhibitory activity against Streptococcus iniae was evaluated by in vitro experiments. For this purpose, gram-positive and catalase negative lactic acid bacteria were screened based on probiotic characteristics such as acid and bile salt tolerance, antimicrobial activities against S. iniae and bio-safety assay including haemolytic activity and antibiotic susceptibility to eight major commercial antibiotics. At last, genotypic identification of candidate lactic acid bacteria isolates carried out by 16S rRNA gene sequence analysis. Based on results, among 148 bacterial isolates, five lactic acid bacteria strains belonged to the Lactococcus lactis subsp. were tolerant to pH=3-7.5, fish bile extract (10%) and had antimicrobial activity against S. iniae. Also, the bio-safety assay results revealed that none of the bacterial strains showed beta-haemolytic activity and all candidate bacterial strains exhibited phenotypic resistance to tetracycline. The multiple antibiotic resistant (tetracycline and chloramphenicol) was observed only in L. lactis NABRII61. This study showed that the five lactic acid bacteria isolated from rainbow trout intestinal microflora could be considered as probiotic strains in aquaculture. However, further experiments are required to confirm the nature of antibiotic resistance.