شناسايي فنوتپي و ژنوتيپي گونه‌هاي مختلف شيگلا از غذا براساس ژن IpaH و تعيين الگوي آنتي‌بيوتيكي جدايه‌ها

Phenotypic and genotypic characterization of isolated Shigella spp. from food based on IpaH gene and evaluation of their antibiotic patterns

غذا ماده حياتي است كه بدون آن موجود زنده قادر به زيستن نخواهد بود، اما اين ماده حياتي مي تواند بعنوان عاملي براي انتقال بيماري به انسان باشد. بنابراين به دليل اهميت شيگلا به عنوان ارگانيسمي كه باعث ديسانتري در انسان مي شود تحقيق حاضر بدنبال جداسازي شيگلا از مواد غذايي مي‌باشد. بطور كلي صد نمونه مواد غذايي شامل چهل نمونه سبزيجات، 30 نمونه مرغ، 20 نمونه گوشت چرخ‌كرده، 10 نمونه ماهي جمع آوري گرديد. نمونه ها به محيط كشت گرم‌نگاتيو‌براث منتقل شده و سپس به محيط‌هاي افتراقي مك‌كانكي و سالمونلا‌شيگلا‌آگار انتقال يافته است.كلني‌هاي مشكوك خالص‌سازي‌شده و به كمك تستهاي بيوشيميايي شناسايي شدند.جدايه‌ها بر‌اساس ژن ipaH بكمك آزمون PCR مورد شناسايي مولكولي قرارگرفتند. پس از آن سروتايپينگ جدايه‌ها و الگوي‌آنتي بيوتيكي ميكروارگانيسم‌ها مورد ارزيابي قرار گرفتند. از صد نمونه مورد ارزيابي از بين مواد غذايي تنها شيگلا از سبزيجات جداسازي گرديد. جدايه‌ها ( 6 سويه ) به كمك آزمون مولكولي تاييد شدند و همگي در جنس شيگلا قرار دارند. همچنين بر اساس تست اگلوتيناسيون جدايه‌ها متعلق به يك سويه ديسانتري، دو سويه سونئي، دو سويه فلكسنري و يك سويه غير قابل شناسايي گزارش گرديد. علاوه بر اين باكتريها الگوهاي متفاوتي در رابطه با آنتي‌بيوتيكها نشان دادند بطوريكه سويه شماره 1 با 100% حساسيت نسبت به تتراسايكلين ارزيابي گرديد و نسبت به ساير آنتي‌بيوتيكها مقاومت نشان دادند.از آنجاييكه غذا ماده‌ايي موثر در انتقال ميكروارگانيسمهاست بنابراين مانيتوركردن مواد غذايي در ماركتها و سبزي فروشي‌ها‌ از اهميت ويژه‌اي برخوردار است .

Food is a vital substance which is important for human life. Although this vital matter could be a vehicle for transferring the microorganisms to human and Shigella is an important microorganism which could be cause of dysentery to human, the present study tried to isolate and characterized isolated Shigella from food.In this study 100 food samples including: 40 types of vegetables, 30 chicken, 20 minced meat and 10 fish have been collected. The samples were inoculated to gram negative broth and transferred to differential media such as MacConkey and Salmonella Shigella agar. Then the suspected colonies were identified using biochemical tests. Afterward, the isolates were characterized using ipaH gene by PCR technique. Furthermore, they were analyzed using serotyping techniques and the antibiotic susceptibility pattern were checked. Out of 100 foodstuffs the bacteria were detected only from vegetables. The isolates (n= 6) were confirmed by molecular techniques and all of them belong to the genus of Shigella. In addition the slide agglutination test showed that the isolates were belong to sh. dysentriae (n=1), Sh. sonnei (n=2), Sh. flexneri (n=2), and one non detectable. Furthermore, they showed different antibiotic pattern, as the isolate No.1 showed 100% sensitivity to the tetracycline and were resistant to the others Although foodstuffs are so important in transferring the microorganism, the monitoring of foods in market and greengrocery is necessary.