بررسي توزيع‌پذيري آنزيم آلفا آميلاز در سيستم دوفازي آبي حاوي پلي‌اتيلن گليكول و تري سديم سيترات

lt;strong gt;مقدمه: lt;/strong gt; يكي از راهكارهاي جداسازي محصولات بيوتكنولوژي، استفاده از سيستم­هاي دوفازي آبي به جاي سيستم­هاي رايج استخراج با حلال است. سيستم­هاي دوفازي آبي روشي كاربردي براي جداسازي و تخليص مخلوط بيومولكول­ها بشمار مي­روند. از سيستم­هاي دوفازي آبي مي­توان در تخليص پروتئين از مجموعه بيومولكول­هاي موجود در سوسپانسيون تخميري استفاده كرد. هدف از تحقيق حاضر بررسي توزيع پذيري آنزيم آلفاآميلاز در سيستم دوفازي آبي پليمر نمك است. lt;br / gt; lt;strong gt;مواد و روش­ها: lt;/strong gt; در اين پژوهش سيستم دوفازي آبي شامل پلي اتيلن گليكول با وزن مولكوليg.mol lt;sup gt;1 lt;/sup gt;1000 و نمك تري سديم سيترات كه نمكي زيست سازگار است، براي توزيع آنزيم آلفا آميلاز  در نظر گرفته شد. در ابتدا جهت ارزيابي محدوده دوفازي از روش تيتراسيون نقطه ابري براي رسم منحني بينودال استفاده شد. همچنين اثر پارامترهاي عملياتي از جمله غلظت پليمر، نمك آلي و غلظت آنزيم به روش باكسبنكن بر روي توزيع­پذيري آنزيم ارزيابي گرديد. نتايج بدست آمده براي ضريب توزيع­پذيري حاصل از آزمايش­ها، مورد بررسي آماري قرار گرفته و نتايج به صورت يك مدل درجه دوم ارائه گرديد. lt;br / gt; lt;strong gt;يافته­ ها: lt;/strong gt; نتايج حاصل از رسم منحني بينودال محدوده دوفازي را براي سيستم دوفازيآبي بر پايه پليمرنمك آلي نشان مي­دهد. يافته‌هاي پژوهش حاضر بر روي توزيع­پذيري نشان داد كه غلظت اجزاي تشكيل دهنده­ سيستم دوفازي آبي اثر معني­داري بر توزيع آنزيم آلفا آميلاز دارند. همچنين نتايج نشان داد كه بيشترين ضريب توزيع آلفا آميلاز در سيستم متشكل از پلي اتيلن گليكول و نمك تري سديم سيترات، مقدار 681/2 را به خود اختصاص مي­دهد. در شرايط بهينه توزيع­پذيري آنزيم مورد بررسي در سيستم دوفازيآبي 102/3 تخمين زده شده است. lt;br / gt; lt;strong gt;نتيجه­ گيري lt;/strong gt;: نتايج نشان مي­دهد كه غلظت پليمر، نمك آلي تري­سديم سيترات و آنزيم آلفاآميلاز بر روي توزيع­پذيري بسيار اثرگذار هستند. بنابراين در شرايط بهينه سيستم دوفازيآبي پليمرنمك آلي سيستم مناسبي براي تخليص آنزيم است lt;em gt;.  lt;/em gt;