شناسايي miRNAها و ژن هاي هدف بالقوه آن ها در گلرنگ زراعي (Carthamus tinctorius L)

Identification of conserved miRNAs and their putative target genes in safflower (Carthamus tinctorius L

microRNAها (miRNA) گروهي از RNAهاي غير كدكننده و كوتاه (~21 نوكلئوتيد) هستند كه از طريق تنظيم بيان ژن ها در سطح پس از رونويسي نقش كليدي را در توسعه و فيزيولوژي گياه ايفا مي كنند. ازآنجايي كه تاكنون مطالعه جامعي در رابطه با شناسايي miRNAهاي گلرنگ به روش in silico انجام نشده است، در اين پژوهش با آناليز توالي هاي ژنومي، 124 miRNA بالقوه متعلق به 26 خانواده حفاظت شده، شناسايي و حضور 2 مورد از آن ها در ژنوم گلرنگ با استفاده از RT-qPCR تاييد شد. اين 29 خانواده miRNA به طور چشم گيري در اندازه متفاوت هستند. آناليز توالي هاي pre- miRNA نشان داد كه طول اين پيش سازها در گلرنگ از 57 تا 317 با ميانگين 40/1 ± 95/88 نوكلئوتيد متغير است. ديگر نتيجه مهم به دست آمده در اين مطالعه، موفقيت در تعيين كلاسترهاي miR169، miR395 و miR397 در ژنوم گلرنگ بود. در مطالعه پيش رو براي نخستين بار اعضاي خانواده هاي miR393، miR477، miR530، miR6111، miR6113 و miR6114 در ژنوم گلرنگ شناسايي شد. با استفاده از پروتكل هاي ارائه شده در مطالعات پيشين، درمجموع 84 ژن هدف بالقوه براي miRNAهاي گلرنگ شناسايي شد. ژن هاي هدف اين قبيل از ژن ها، فاكتورهاي رونويسي، پروتئين هاي دخيل در همانندسازي DNA و آنزيم هاي متابوليكي را شامل مي شوند. نتايج اين مطالعه نشان داد كه miRNAهاي حفاظت شده در گلرنگ وجود دارند و مي توانند عملكرد موثري در پاسخ به تنش هاي محيطي نيز داشته باشند.

miRNAs are a class of non-coding and small RNAs (~ 21 nucleotides) performs a key function in plant growth and physiology by regulating gene expression in post-transcriptional level. Since there has not been a comprehensive study on identification of the miRNAs of safflower (Carthamus tinctorius L) using in silico method, in current study, 124 potential miRNAs belonging to 26 conserved families were identified and two miRNAs were validated using qRT-PCR technique. The 29 miRNA families were significantly different in size. Safflower pre- miRNAs greatly varied from 57 to 317 nt in length with an average of 94.56 ± 38.1 nt. Another result of this study was the success in determining miR169, miR395 and miR397 clusters in the safflower genome. In the present study, the family members of miRNAs including miR393, miR477, miR530, miR6111, miR6113, and miR6114were recognized which have not previously been reported. A total of 84 potential target genes were predicted for the identified safflower miRNAs including transcription factors, proteins involved in DNA replication, and metabolic enzymes. The results of this study showed the existence of conserved miRNAs in safflower and may be important role in response to environmental stress.