تعيين جنسيت قناري بر پايۀ ژن CHD مربوط به كروموزوم‌هاي جنسي با استفاده از پر

Sex determination in the canary based on the CHD gene located at the sex chromosome using feather

هدف از اين تحقيق استفاده از پر به ­عنوان روشي ساده، سريع، كم­ هزينه، بدون خطر و ايمن و مطمئن براي تعيين جنسيت قناري در اوايل تولد، براي كمك به برنامه‌هاي اصلاح نژادي و پرورش اين پرنده است. شكل ظاهري جنس نر و مادۀ بسياري از پرندگان از جمله قناري تا حدودي همانند هم بوده و تشخيص جنسيت آن‌ها بسيار دشوار است. با استفاده از اين روش مولكولي بر پايۀ اختلاف طول ژن (Chromo-helicase-DNA(CHD در كروموزوم­هاي جنسي Z و W و با به ­كارگيري روش PCR مي­ توان در بدو تولد جنسيت پرنده را تشخيص داد. در اين بررسي از خون و پر140 قطعه قناري از ده نژاد مختلف نمونه‌گيري و استخراج DNA انجام شد. لازم به يادآوري است در آغاز پنج جفت آغازگر براي انجام PCR طراحي و درنهايت يك جفت آغازگر اختصاصي بر پايۀ دقت تشخيص جنسيت تأييد و استفاده شد. نتايج نشان­دهندۀ افزونش قطعۀ DNAبه طول 252 جفت باز در جنس نر (ZZ) و دو قطعه به طول­هاي 252 و 309 جفت باز (تفاوت 57 جفت بازي) در جنس ماده (ZW) بود. توالي­يابي DNA اين دو قطعه انجام شد و براي نخستين بار توالي اين دو قطعه از ژن CHD در گونۀ قناري به نام­هاي CHDZ-1 و CHDW-1 با شماره‌هاي شناسايي MG679825.1 و MG679826.1 در سايت NCBI ثبت شد. با توجه به نتايج، مي­توان از اين روش، كه براي نخستين بار با استفاده از توالي DNA ژن CHD قناري به دست آمد به‌عنوان روشي كاربردي و مطمئن براي تعيين جنسيت قناري استفاده كرد.

The aim of this research was to utilize a simple, rapid, cheap and safe method for sex determination of newly born canaries through feather to help accurately breeding this bird. The external morphology of males and females of many birds such as canary are fairly similar to each other, Therefore, determining their sexes is very difficult. The different length of CHD (chromo-helicase-DNA-binding) gene in Z and W chromosomes can recignized by using molecular technique based and PCR method, for the sex determination of young birds. In this study, blood and feathers samples of 140 canaries from 10 different breeds were used and their DNA were extracted. It should be mentioned that for PCR, at first 5 primers designed and finally 1 specific primer were confirmed and used. The results showed that the amplification of a fragment with the length of 252 bp for males (ZZ) and two fragments with the lengths of 252 and 309 bp for female (ZW). The bands had a length difference of 57 bp. The DNA sequencing of these two fragments was done for the first time, the sequence of these two fragments of the CHD gene in canary species was submitted and accepted in the NCBI site under the names of CHDZ-1 and CHDW-1 with the accession numbers of MG679825.1 and MG679826.1.