بررسي فعاليت آنزيم بتا ۱ و ۴ اندوگلوكاناز در سه نماتد بيمارگر گياهي

ديواره سلولي گياه ميزبان، سد مكانيكي اصلي براي نفوذ و مهاجرت نماتدهاي انگل گياهي محسوب مي شود. اين نماتدها جهت تجزيه ديواره سلولي، انواع مختلفي از آنزيم هاي تجزيه كننده ديواره سلولي را ترشح مي‌كنند. بتا 1 و 4 اندوگلوكاناز از اولين آنزيم هاي تجزيه كننده شناخته شده در اين ارتباط است. در اين پژوهش، فعاليت آنزيم مذكور در سه گونه شاملMeloidogyne incognita  ،Pratylenchus loosi  و Aphelenchoides besseyi مورد مطالعه قرار گرفت. ابتدا با انجام نمونه برداري، شناسايي، خالص سازي و تكثير هر سه گونه نماتد، استخراجDNA  انجام شد. سپس با استفاده از پرايمر دژنره اختصاصي و به كمك واكنش زنجيره اي پلي مراز، ژن كد كننده آنزيم بتا ۱ و ۴ اندوگلوكاناز در نماتدهاي مذكور تشخيص داده شد. استخراج RNA  كل از هر سه گونه انجام شد. بعد از آن، cDNA تهيه و با استفاده از ژن مرجع، درستيcDNA ها مورد بررسي قرار گرفت. سپس شدت بيان ژن كد كننده آنزيم بتا 1 و 4 اندوگلوكاناز براي نمونه ها بررسي شد. نتايج نشان داد كه ژن كدكننده آنزيم بتا ۱ و ۴ اندوگلوكاناز، بيشترين فعاليت آنزيمي و شدت بيان را در نماتد مولد گره (M. incognita) داشت.نماتد مولد زخم ريشه چاي (P. loosi) و نماتد نوك سفيدي برگ برنج (A. besseyi)به ترتيب در رتبه هاي بعدي قرار گرفتند.