جداسازي باكتريوفاژ لايتيك Ab72p عليه اسينتوباكتر بوماني مقاوم به داروي جدا شده از عفونت سوختگي

ISOLATION OF LYTIC BACTERIOPHAGE AB72P AGAINST MULTIDRUG RESISTANT ACINETOBACTER BAUMANNII ISOLATES OBTAINED FROM BURN INFECTION

پيش زمينه و هدف اسينتوباكتر بوماني يك باكتري گرم منفي و عامل طيف وسيعي از عفونت هاي شديد بيمارستاني است. اين باكتري به علت ويژگي هاي ذاتي و توانايي قابل توجه در كسب سريع ژن هاي مقاومت، به بسياري از عوامل ضد ميكروبي مقاوم و به مشكلي اساسي براي بيمارستان ها تبديل شده است. در سال هاي اخير استفاده از باكتريوفاژهاي لايتيك جهت حذف سويه هاي MDR اسينتوباكتر بوماني از مراكز كلينيكي مورد توجه قرار گرفته است. در همين راستا، هدف از مطالعه حاضر، جداسازي باكتريوفاژ لايتيك عليه يك ايزوله ي MDR اسينتوباكتر بوماني جدا شده از عفونت هاي سوختگي بود. مواد و روش كار براي جداسازي فاژ لايتيك، نمونه هاي مختلف حاوي فاژ احتمالي شامل آب بركه، آب رودخانه، آب دريا، پساب شهري و خاك يك پارك جنگلي، به وسيله ي روش آگار دو لايه و آزمايش لكه گذاري مورد بررسي قرار گرفتند. يافته ها باكتريوفاژ لايتيك Ab72p عليه ايزوله ي MDR اسينتوباكتر بوماني، از پساب شهري جدا و به عنوان عضوي از خانواده ي مايوويريده طبقه بندي گرديد. پلاك هاي ايجاد شده به وسيله ي فاژ Ab72p، پلاك هاي 1 تا 2 ميلي متري كاملا شفاف و بدون هاله بودند. فاژ Ab72p داراي سري متقارن به قطر تقريبا 11 نانومتر و دمي قابل انقباض به طول 22-17 نانومتر بود. ژنوم فاژ Ab72p، DNA دو رشته اي بود و در حدود kb 46 تخمين زده شد. فاژ Ab72p در دماهاي بالا (تا 70 درجه ي سانتيگراد) و دامنه ي وسيعي از pH (3 تا 11) بسيار پايدار و داراي زمان جذب مناسب (99 درصد ذره هاي فاژي در طي 10 دقيقه جذب باكتري ميزبان شدند) و ميزان توليد نتاج بالايي (در حدود 200 ذره ي فاژي به ازاي هر سلول عفوني شده) بود. نتيجه گيري با توجه به نتايج اين تحقيق فاژ Ab72p مي تواند گزينه ي مناسبي جهت تهيه ي مخلوط فاژي عليه ايزوله هاي اسينتوباكتر بوماني باشد.

Background & Aims: Acinetobacter baumannii is a gram-negative pathogen that causes a wide range of hospital-acquired infections. Due to its intrinsic traits and its remarkable abilities to quickly acquire resistance genes, it has become resistant to most antimicrobial agents and a major problem for hospitals. In recent years, application of lytic bacteriophages has been considered to eradicate multidrug resistant (MDR) A. baumannii from the clinical setting. The purpose of this research was to isolate a lytic bacteriophage against MDR A. baumannii isolate obtained from an infected burn site. Materials & Methods: Different samples including lake, river and seawater, soil and municipal wastewater were tested for phage isolation by spot test and agar overlay method. Results: Lytic bacteriophage Ab72p against MDR A. baumannii isolate was isolated from municipal wastewater sample and classified as a member of Myoviridae family. The plaques formed by lytic phage Ab72p were completely clear plaque and had a diameter of 1- 2 mm without halo. Phage Ab72p had an about 11 nm (in diameter) icosahedral head and a 17-22 nm (in length) contractile tail. The genome of phage Ab72p was double-stranded DNA with about 46 kb. Phage Ab72p was a very stable lytic phage in the high temperatures (up to 70 ºC) and wide range of pH (3 to 11), with an appropriate adsorption rate (99% adsorbed within 10 minutes), and large burst size (200 PFU per infected cell). Conclusion: Phage Ab72p could be appropriate choice to prepare phage cocktail against A. baumannii isolates.