شناسايي و تشخيص اشريشياكل يانتروهموراژي كدر شير گاوهاي شهرستان بروجرد با روش مولكولي

Identification and Diagnosis of Enterohemorrhagic E. Coli by Molecular Method in Boroujerd City Cows' Milk

زمينه و هدف: انتقال باكتري­هاي بيماري­زا از حيوان به انسان به­ صورت مستقيم و يا از طريق مصرف گوشت و شير و يا فراورده ­هاي آنها امكان­پذير است. هدف از انجام اين مطالعه، شناسايي و تشخيص اشريشياكلي انتروهموراژيك در شير گاوهاي شهرستان بروجرد با روش مولكولي بوده است. روش بررسي: در يك مطالعه­ ي توصيفي و مقطعي، تعداد 150 نمونه شير در مدت 4 ماه از ابتداي آبان ماه 1395 تا پايان بهمن ماه همان سال از گاوداري­هاي موجود در شهرستان بروجرد و حومه نمونه­ برداري شد. نمونه ­هاي شير پس از انجام مراحل غني سازي، كشت و آزمون­هاي بيوشيميايي بر روي EMBآگار و تست­هاي افتراقي IMVIC، و كشت خطي بر روي محيط سوربيتول مك كانكي آگار، جهت شناسايي جدايه­ هاي سوربيتول منفي، و تاييدشان توسط تست سرولوژي و شناسايي ژن eaeA به­ وسيله تست PCR بررسي گرديدند. يافته ها: از مجموع 31 ايزوله اشريشياكلي جداشده، تعداد 6 ايزوله به­عنوان سوربيتول منفي جداسازي شد(19/4%). از مجموع 6 ايزوله، تعداد 5 ايزوله(16/1%) بر روي محيط كروم آگار از نظر فعاليت بتاگالاكتوزيدازي منفي (MUG-) شناخته شدند. هر 5 ايزوله در تست سرولوژيك با آنتي سرم O157:H7 تاييد گرديد و در بررسي مولكولي صورت گرفته داراي ژن eaeA بودند. نتيجه گيري: شيوع 16/1% اشريشياكلي انتروهموراژيك در شيرخام به­ عنوان يكي از عوامل ايجاد اسهال در جامعه مي­ تواند از اهميت زيادي برخوردار باشد. لذا طغيان­هاي ناشي از مصرف اين ماده غذايي در مناطقي از كشور كه به لحاظ سنتي هنوز مصرف شيرخام را در سبدغذايي قرار مي­دهند، مي­تواند نتايج باارزشي در جهت پيشگيري از موارد بيماري­هاي اسهالي به­ دست آورد.

Background and Aim: Transmission of pathogenic bacteria from animals to humans is possible directly or through the consumption of meat and milk or their products. The aim of this study was to identify and diagnose Enterohemorrhagic Escherichia coli(E. coli) by molecular method in cows' milk in Boroujerd city. Materials and Methods: In a descriptive cross-sectional study, 150 milk samples were sampled from dairy farms in Boroujerd and its suburbs in four months from the beginning of November 2016 until the end of February 2017. After enrichment, culturing and biochemical tests on EMB agar and IMVIC differential tests, and doing linear culture on Sorbitol McConkey Agar medium to identify negative sorbitol isolates and confirm them by serological testing and eaeA gene identification, milk samples were analyzed by PCR test. Results: Out of 31 isolates of Escherichia coli species, 6 were isolated as negative sorbitol(19.4%). Of these six isolates, five(16.1%) were identified as negative beta-galactosidase(MUG-) on chrome agar medium. In serological test, all 5 isolates were confirmed by O157: H7 antiserum antibody; besides, in molecular analysis, they had eaeA gene. Conclusion: The outbreak of 16.1% of enterohemorrhagic E. coli in milk can be of great importance as one of the factors causing diarrhea in the community. Therefore, the outbreaks of consumption of this foodstuff in areas of the country that traditionally still put raw milk in food basket can provide valuable results for the prevention of diarrheal diseases.