بهينه سازي بيان موقت ژن به واسطه آگروباكتريوم (Agroinfiltration) در برگ و جوانه گياه جو (Hordeum vulgare L.)

جو (Hordeum vulgare L.) يكي از مهم ترين گياهان زراعي در دنيا است و به عنوان يك سامانه توليد پروتئين هاي نوتركيب نيز در بيوتكنولوژي كشاورزي اهميت يافته است. در گياهاني مانند غلات كه باززايي و تراريختي آن ها مشكل است، در برخي موارد بيان موقت يا گذراي ژن به عنوان جايگزيني براي روش پايدار در نظر گرفته مي شود. بيان موقت ژن توسط آگروباكتريوم (Agroinfiltration)، روشي ارزان و سريع براي بررسي عملكرد ژن ها و بررسي عملكرد عناصر موثر بر بيان ژن (نواحي ترجمه نشونده، اينترون ها، عوامل رونويسي و پروموترها) است. با استفاده از اين روش، بررسي نحوه كاركرد سازه ژني فقط با گذشت چند روز و بدون پشت سر گذاردن مراحل وقت‌گير باززايي گياه امكان پذير است. به منظور بهينه سازي اين روش در گياه جو، اثر تيمارهاي مختلف مانند نوع بافت، سن گياه، محل برگ، غلظت استوسيرينگون، زمان بررسي پس از تلقيح، سويه آگروباكتريوم، غلظت (OD) محيط القا، نوع روش، مدت زمان فعاليت پمپ خلا و تعداد آن و نيز ژنوتيپ بر بيان موقت ژن گزارشگر  ß-glucuronidaseدر برگ گياه جو در اين تحقيق بررسي شد. علاوه بر آن، اثر محيط القا، سويه آگروباكتريوم و ژنوتيپ بر بيان موقت ژن گزارشگر در جوانه گياه جو نيز مورد مطالعه قرار گرفت. بيان موقت ژن ß-glucuronidase در تمامي نمونه هاي جوانه رقم بهمن و ژنوتيپ EC-82-6 گياه جو كه با سويه GV3301 آگروباكتريوم واجد اين سازه در محيط القا با غلظت استوسيرينگون 200 ميكرومولار به وسيله سوزن انسولين تلقيح شده بودند، مشاهده شد. بر اساس نتايج اين تحقيق، يك روشي كارا و ارزان قيمت براي بيان موقت در گياه جو با استفاده از آگروباكتريوم معرفي مي شود.