تأثير عصاره ريز جلبك اسپيرولينا بر روي بيان ژن ضد آپوپتوتيك Bcl-2 در رده سلولي سرطان مغز

The effect of Spirulina Microalgae extract on Bcl-2 Anti-Apoptotic Gene Expression in Brain Cancer Cell Line

مقدمه: رده سلولي U87 شامل سلول­هاي سرطاني گليوبلاستوما به عنوان حادترين نوع تومور مغزي از رده انساني مي­باشد. افزايش بيان ژن Bcl-2 در سلول­هاي سرطاني اثر ضدآپوپتوزي دارد. در مطالعه حاضر اثر عصاره جلبك اسپيرولينا بر روي ميزان بيان ژن در رده سلول سرطاني بررسي شده است. عصاره جلبك داراي مقادير زيادي بتا كاروتن است كه ماده­اي ضد سرطان است. امروزه به علت عوارض جانبي داروهاي شيميايي، تمايل به استفاده از جلبك‌ها و گياهان دارويي در درمان بيماري‌ها افزايش يافته است. روش كار: گروه مورد بررسي در اين مطالعه رده سلولي U87 مي­باشد. در اين مطالعه رده سلولي سرطان مغز از مركز ذخاير زيستي و ژنتيكي ايران تهيه و كشت داده شد. سلول­ها به دو گروه تيمار و كنترل تقسيم شدند. تأثير عصاره جلبك اسپيرولينا روي گروه تيمار با استفاده از MTTسنجيده شد. ژن مرجع در اين مطالعه GAPDH بود. RNA از سلول­هاي گروه تيمار و كنترل استخراج و cDNA ساخته شد. ميزان نسبي بيان ژن­ها با استفاده ازReal-time PCR و Ct∆∆ مورد بررسي قرار گرفت. نتايج با استفاده از نرم­افزار REST 2009 V2.0.13 آناليز گرديد. يافته­ها: نتيجهMTT نشان داد كه IC50 در 48 ساعت تيمار، mg/ml01/10 مي­باشد. با انجامReal-time PCR مشخص شد كه در اين سلول­ها، ميزان بيان ژن ضد آپوپتوزي Bcl-2 به ميزان 3 برابر كاهش پيدا كرد و با توجه به اينكه 05/0>p- value است (p- value=0) اين كاهش معني­دار است. نتيجه­گيري: با توجه به نتايج مي­توان گفت كه در سلول­هاي گروه تيمار با عصاره جلبك ميزان بيان Bcl-2 سه برابر و به­طور معني­داري كاهش داشته است.

Introduction: U87 cell line contains glioblastoma cancer cells as the most acute type of human brain tumor. Increased expression of Bcl-2 gene in cancer cells has anti-apoptotic effect. In the present study the effect of Spirulina extract on gene expression in cancer cell line was investigated. Algae extract contains large amounts of beta-carotene, which is an anticancer substance. Today, because of the side effects of chemical drugs, the tendency to use algae and medicinal plants in the treatment of diseases has increased. Matheriales and Methods: The brain cancer cell line was procured and cultivated from the Iranian Biological Resource Center. Cells were divided into two treatment and control groups. Spirulina alga extract was affected on the treatment group and its toxicity was measured using MTT assay. The reference gene in this study was GAPDH. RNA was extracted from control and control cells and cDNA was made. The expression of genes was evaluated using ∆∆Ct in Real-time PCR. Results: The result of MTT assay showed that the IC50 value was 10.01 mg/ml for the 48-hour treatment. The result of Real-time PCR showed that the expression of Bcl-2, the anti-apoptotic gene, decreased by 3 times in treatment group. Decreased gene expression was statistically significant because p-value was less than 0.05 (p-value = 0). Conclusion: According to the results of MTT assay and Real-time PCR, the expression of Bcl-2 decreased 3 times in treatment group significantly.