تعيين فراواني ژن هاي VIM 2˓3˓9˓11˓16و VIM all توليدكننده آنزيم متالو بتالاكتاماز در باكتري پسودوموناس آئروژينوزا

The Frequency of VIM 2, 3, 9, 11 and VIM all among Metallo-beta-Lactamase Producing Pseudomonas aeruginosa

مقاومت آنتي بيوتيكي همواره به عنوان يك مشكل جدي براي سلامت انسان مطرح بوده است و بيماران زيادي را در بيمارستان هاي سراسر جهان تحت تاثير قرار داده است. پسودوموناس آئروژينوزا يك پاتوژن گرم منفي و يكي از عوامل شايع عفونت هاي بيمارستاني است. آنزيم هاي متالو بتالاكتاماز، اصلي ترين مكانيسم مقاومت به آنتي بيوتيك هاي بتالاكتام در اين باكتري مي باشد. ژن هاي توليدكننده اين آنزيم بيشتر بر روي پلاسميد قرار دارد. هدف از اين مطالعه ارزيابي فراواني ايزوله هاي پسودوموناس آئروژينوزا مولد متالو بتالاكتاماز كه توسط ژن هاي VIM 2˓3˓9˓11˓16 و VIM all ايجاد مي گردد. مواد و روش ها꞉ در اين مطالعه 127 ايزوله پسودوموناس آئروژينوزا با روش استاندارد ديسك ديفيوژن كربي بائر طبق دستورالعمل CLSI، جهت آنتي بيوگرام استفاده گرديد. و از روشCombined-disk test جهت شناسايي فنوتايپي ايزوله هاي توليدكننده متالو بتالاكتاماز استفاده شد. پس از استخراج DNA، با استفاده از فناوري PCR وجود ژن هاي VIM allو VIM 2˓3˓9˓11˓16 به طور اختصاصي بررسي گرديد. يافته هاي پژوهش꞉ از كل 127 نمونه سودوموناس مورد بررسي 62 ايزوله (49 درصد) مقاوم به ايمپنم بودند و نيز 31 ايزوله (24/5 درصد) در بررسي فنوتايپي توليدكننده متالو بتالاكتاماز بودند. هم چنين در بين سويه هاي مقاوم به ايميپنم به شكل كلي حضور ژن هاي all VIM در 12/5 درصد موارد به دست آمد ولي حضور ژن هاي VIM 2-3-9-11-16 در نمونه هاي مورد بررسي شناسايي نشدند. بحث و نتيجه گيري꞉ يافته هاي به دست آمده در اين تحقيق بيان كننده اين موضوع است كه باكتري پسودوموناس آئروژينوزا بيشترين مقاومت آنتي بيوتيكي را به سفازولين (98 درصد) و هم چنين به ناليديسك اسيد (91 درصد) و كمترين مقاومت را به سيپرو فلوكسازين (31 درصد) نشان داده است كه يكي از دلايل اين روند رو به رشد توليد آنزيم هاي مقاوم به آنتي بيوتيك ها و مكانيسم هاي شناخته شده اين باكتري در ايجاد مقاومت مي باشد.

Antibiotic resistance crisis has always been a serious problem for human health and many hospitalized patients are affected worldwide. Pseudomonas aeruginosa is a gram-negative pathogen and one of the most common causes of nosocomial infections. The main mechanism of resistance to beta-lactam antibiotics is the presence of metallo-beta-lactamase (MBL) enzymes. Most of the MBL genes are found in plasmids. The aim of this study was to evaluate the frequency of MBL-producing P. aeruginosa isolates caused by VIM-all and VIM 2, 3, 9, 11and16 genes. Materials & Methods Antimicrobial susceptibility of 127 clinical isolates of P. aeruginosa was determined using the standard Kirby-Bauer disk diffusion method according to Clinical and Laboratory Standard Institute (CLSI). Combined-disk test was used for phenotypic determination of MBLs-producing isolates. After DNA extraction, VIM-all and in specific, VIM 2, 3, 9, 11 and 16 genes were amplified using PCR method. Findings: A total Of 127 clinical isolates of P. aeruginosa, 62 isolates (49%) were resistant to imipenem and 31 isolates (24.5%) showed phenotypic evidences of MBL production. Moreover, among imipenem resistant strains VIM-all genes were found in 12.5% of cases, but the VIM 2-3-9-11 and 16 genes were not detected in samples. Discussion & Conclusions: The results obtained in this study suggest that in P. aeruginosa, the highest antibiotic resistance observed was to cefazolin (98%) followed by nalidixic acid (91%) and the least resistance were to ciprofloxacin (31%). One of the reasons for this trend is the growth of antibiotic-resistant bacteria and the known mechanisms of bacterial resistance.