توليد پروتئين نوتركيب ارگوكونين و كاربرد آن در فيلم پلي‌لاكتيك اسيد به منظور كنترل آلودگي‌هاي قارچي آسپرژيلوس نايجر و پني‌سيليوم نوتاتيوم در شرايط آزمايشگاهي

سابقه و هدف: قارچ‌ها از مهم‌ترين دلايل فساد مواد غذايي هستند. استفاده از بسته‌بندي‌هاي فعال ضدميكروبي، موجب افزايش ايمني و ماندگاري مواد غذايي مي‌شود. اين تحقيق با هدف توليد تركيب ضد قارچي (ارگوكونين) و كاربرد آن در فيلم پلي‌لاكتيك اسيد به منظور كاهش آلودگي‌هاي قارچي آسپرژيلوس نايجر و پني‌سيليوم نوتاتيوم انجام شد. مواد و روش‌ها: براي توليد پروتئين نوتركيب ارگوكونين، ژن هدف به وكتور بياني pET21 وارد شد. وكتور نوتركيب پس از تكثير در باكتري اشريشيا كلي DHα به باكتري  اشريشيا كلي (DE3) BL21 به عنوان ميزبان بيان منتقل گرديد. بيان ژن با استفاده از روش‌هاي SDSPAGE، وسترن بلات و دات بلات بررسي شد. به منظور تخليص پروتئين نوتركيب، از ستون كروماتوگافي ميل‌تركيبي استفاده شد. فيلم‌هاي زيست‌فعال پلي‌لاكتيك اسيد به روش قالب‌گيري و افزودن مقادير مختلف ارگوكونين (0، 0.25، 0.5 و 0.75 درصد) به محلول 4 درصد وزني پلي‌لاكتيك اسيد تهيه شدند. به منظور بررسي اثر ضدقارچي فيلم پلي‌لاكتيك اسيد از روش انتشار ديسك استفاده شد. يافته‌ها: ژن ارگوكونين با استفاده از آغازگرهاي اختصاصي به خوبي تكثير شد. بيان پروتئين نوتركيب با روش SDSPAGE و تاييد آن با دات بلات و وسترن بلات انجام گرفت. تركيبات گوكونين داراي اثر ضدقارچي بر روي هر دو قارچ بود. قطر هاله عدم رشد براي هر دو قارچ نيز، با افزايش غلظت ارگونين افزايش يافت. همچنين فيلم فعال، اثر ضدقارچي بيشتري بر روي قارچ پني‌سيليوم نوتاتيوم داشت. نتيجه گيري: ارگوكونين با جلوگيري از سنتز گلوكان در ديواره قارچ‌ها موجب نابودي آن‌ها مي‌شود. بنابراين فيلم پلي‌لاكتيك اسيد حاوي ارگوكونين مي‌تواند به عنوان بسته‌بندي فعال ضدميكروبي در راستاي افزايش ايمني مواد غذايي استفاده شود.