بررسي ميزان بيان miR-20a و miR-204 موثر بر اتوفاژي در سرطان سلول‌هاي غير‌كوچك ريه

Evaluation of MiR-20a and MiR-204 Expression Involved in Autophagy in Non-small Cell lung Cancer

مقدمه: سرطان سلول هاي غيركوچك ريه(NSCLC) شايع ترين نوع سرطان ريه و كشنده ترين سرطان در سراسر جهان مي باشد. اين بيماري اغلب در مراحل پيشرفته تشخيص داده مي شود. يكي از مكانيسم هاي سيستم ايمني براي مقابله با سلول هاي سرطاني ريه، اتوفاژي مي باشد. اتوفاژي يك فرآيند كاتــــابوليكي حفاظت شده است كه طي آن پروتئين ها و اندامك ها از طريق ليزوزوم حذف مي شوند. microRNA ها، RNA هاي كوچك 22-19 نوكلئوتيدي بوده كه به عنوان عوامل تنظيمي مهم در سلول، مي توانند به عنوان انكوژن يا سركوبگر تومور در ايجاد سرطان ريه نقش داشته باشند. نقش miRNA ها در پيشرفت سرطان ريه با تنظيم ژن هاي چنــدين پروتئين عملكردي مسير اتوفاژي حائز اهميت مي باشد. هدف از اين مطالعه بررسي ميزان بيان miR-204-5p و miR-20a موثر بر مسير اتوفاژي در سرطان سلولهاي غير كوچك ريه ميباشد. مواد و روش ها: در اين مطالعه ميزان بيان miR-20a و miR-204-5p توسط تكنيك Real-Time PCR كمي در 30 بيمار مبتلا به سرطان سلول هاي غيركوچك ريه بررسي گرديد. ابتدا استخراج RNA از بافت هاي توموري و نرمال انجام شد، پس از طراحي پرايمر اختصاصي براي RNA مرجع و miRNA هاي مورد مطالعه، سنتز cDNA با استفاده از پرايمرهاي ساقه-حلقه(stem-loop) اختصاصي miR-20a و miR-204-5p انجام شد و نتايج آن با روش 2-∆∆CT آناليز شد. يافته هاي پژوهش: بر اساس آناليز نتايج حاصل از qRT-PCR مشخص گرديد كه در نمونه هاي بافت توموري ميزان بيان miR-20a در بيماران مبتلا به NSCLC، در مقايسه با بافت نرمال افزايش بيان و miR-204-5p كاهش بيان نشان ميدهد. بحث و نتيجه گيري: اين تغـــييرات ميــزان بيان، miR-20a را به عنوان انكوژن و miR-204-5p را به عنوان سركوبگر تومور مطرح مي كند. بنا بر اين اندازه گيري سطح بيان miRNAهاي مورد مطالعه مي تواند بيوماركري جهت تشخيص و پيشرفت سرطان ريه سلول هاي غيركوچك و هم چنين زمينه اي براي درمان هدفمند اين سرطان باشد.

Introduction: Non-small cell lung cancer (NSCLC) is the most common type of lung cancer and the most lethal cancer worldwide. It is often diagnosed at advanced stages. One of the mechanisms of the immune system to fight lung cancer cells is autophagy. Autophagy is a conserved catabolic process in which proteins and organelles are deleted by lysosomes. microRNAs are small RNAs containing about 19–22 nucleotides that function as important regulatory elements in the cell and as oncogene or tumor suppressors in lung cancer. The role of miRNAs is important in lung cancer progression by regulating autophagy genes of several proteins. The aim of this study was to evaluate the expression of miR-204-5p and miR-20a expressions involved in the autophagy pathway in non-small cell lung cancer. Materials & Methods: In this study, miR-204-5p and miR-20a expression levels were studied, using the quantitative Real-Time PCR technique, in 30 patients with non-small cell lung cancer. RNA was extracted from tumor and adjacent normal tissue of NSCLC patients. cDNA was synthesized using specific stem-loop for miR-20a, miR-204-5p, and RNU44 reference gene. Finally, the expression levels of miRNAs were assessed by Real-Time PCR and the data were analyzed using the 2-∆∆CT method. Code of ethics: sbmub.REC.1394.112 Findings: Based on the results of the qRT-PCR analysis it was revealed that miR-20a and miR-204 were upregulated and downregulated in tumor tissues, respectively. Discussion & Conclusions: These changes in the expression level, suggest that miR-20a and miR-204-5p are oncogenes and tumor suppressors, respectively. So, measuring the expression level of miR-20a could be a biomarker for the diagnosis and progression of non-small cell lung cancer as well as a platform for the targeted treatment of cancer.