ايمني زائي آنتي ژن هاي نوتركيب سيستم ترشحي نوع 3 و زير واحد اتصالي سم شبه شيگا از باكتري e.coli o157 h7

Immunization Evaluation of Type III Secretion System Recombinant Antigens and Shiga Like Toxin Binding Subunit of E. coli O157:H7

انتروهموراژيك اشرشياكلي (ehec) باعث اسهال و سندرم هموليتيك اورميك مي شود. با توجه به خطرات ناشي از درمان آنتي بيوتيكي در عفونت ehec o157: h7، واكسن ها روشي اميد بخش براي پيشگيري از عفونت را ارائه مي كنند. هدف از اين مطالعه بررسي ايمني زايي پروتئين هاي نوتركيب intimin،espa وstx2b در برابر عفونت باكتري e.coli o157 h7 مي باشد.مواد و روش ها: در اين مطالعه تحقيقي، بيان پروتئين هاي نوتركيب intimin، espa وstx2b در bl21 de3 e.coli باiptg القا شد. پروتئين هاي نوتركيب با وسترن بلات ارزيابي و كروماتوگرافي تمايلي ni-nta تخليص گرديد. ايمني زايي زيرپوستي و درون صفاقي موش ها انجام و تيتر آنتي بادي توسط elisa تعيين شد. موشها باخوراندن باكتري آلوده و ريزش باكتري و مرگ و مير موش ها بررسي گرديدند. يافته ها: آناليز sds-page بيان پروتئين ها با وزن 11،17 و 35 كيلودالتون را نشان داد. پروتئين هاي نوتركيب توسط وسترن بلات تاييد شد. تيتر پاياني اليزا براي پاسخ هومورال به espa، intimin وstx2b ، 25600 بود. ريزش باكتري در موش هاي ايمن تا cfu/ml 2 10 و مرگ و مير نيز تا 60 درصد كاهش يافت.نتيجه گيري: نتايج نشان داد كه پاسخ ايمني عليه پروتئين هاي intimin ، espa وstx2b باعث حفاظت حيوان در چالش با e.coli o157: h7 مي شود.

Escherichia coli enterohemorrhagic (EHEC) causes diarrhea, hemolysis colitis, and uremic hemolytic syndrome. Due to the dangers of antibiotic treatment in the EHEC O157: H7 infection, vaccines offer a promising way to prevent infection. The purpose of this study was to investigate the immunity of recombinant proteins Intimin, EspA and Stx2b against infection of E. coli O157 H7. METHODS: In this research study, expression of recombinant Intimin, EspA and Stx2b proteins E.coli BL21 DE3 was induced with IPTG. Recombinant proteins were examined by Western Blot and purified using the affinity Ni-NTA chromatography. Subcutaneous and intraperitoneally immunization of mice was performed and the antibody titer was determined by ELISA. The mice were orally infected with bacteria and the bacterial loss and mortality of the mice were examined. FINDINGS: SDS-PAGE analysis showed expression of proteins with 11,17 and 34 kDa molecular weight. The recombinant proteins were confirmed by Western Blot. ELISA end point titer for humoral response to EspA, Intimin and Stx2b was 25600. The loss of bacteria in mice was 102 cfu / ml and mortality rate were reduced to 60 Percent. CONCLUSION: The results showed that immune response against EspA, Intimin and Stx2b proteins protects animals against challenges using E. coli O157: H7.