اثر مهاركنندگي كارواكرول بر بيان ژن اختصاصي ريسه (hwp1) كانديدا آلبيكانس

Inhibitory Effect of Carvacrol on the Expression of Candida albicans Hyphae-Specific Gene (HWP1

عفونت ناشي از كانديدا آلبيكانس مشكل عديده و رو به افزايش در بالين و به ويژه در بيماران دچار ضعف سيستم ايمني است. مطالعه حاضر با هدف بررسي تاثير مهاري كارواكرول بر تشكيل ريسه و بيان ژنhwp1 كانديدا آلبيكانس انجام گرفته است.مواد و روش ها: اين مطالعه مقطعي بر روي نمونه هاي سواب واژن، دهان و سطوح پوست از بيماران مبتلا به ضعف سيستم ايمني انجام گرديد. جدايه هاي كلونيزه كانديدا آلبيكانس حساس به دارو با استفاده از نرم افزار whonet شناسايي شدند. آزمون حساسيت سنجي براي كارواكرول (محدوده رقت 6/25 300 ميكروگرم/ ميلي ليتر) با استفاده از روش ميكرودايلوشن براث (clsi) عليه جدايه هاي حساس كانديدا آلبيكانس تعيين شد .سنجش زمان مرگ سلولي كارواكرول (محدوده رقت دو برابرmic تا يك چهارم mic) انجام گرديد. ممانعت از تشكيل ريسه با استفاده از ميكروسكوپ نوري بررسي شد. با استفاده از rt-pcr كمي ميزان بيان ژنhwp1 در كانديدا آلبيكانس atcc 14053 تعيين گرديد.يافته ها: ده جدايه باليني كلونيزه كانديدا آلبيكانس حساس به دارو شناسايي گرديد. كارواكرول با محدودهmic 25-200 ميكروگرم/ ميلي ليتر موجب مهار رشد جدايه هاي حساس به دارو كانديدا آلبيكانس شد. نتايج سنجش زمان مرگ سلولي تاثير مهاري معني دار كارواكرول را در رشد كانديدا آلبيكانس نشان داد p<0/05. كاهش معني دار تبديل سلول هاي مخمري به ريسه وجود داشت. در جدايه هاي حساس به دارو كانديدا آلبيكانس، كارواكرول ممانعت از تشكيل ريسه نمود. بيان ژن hwp1 در رقت هاي معادل دو برابرmic و برابر mic كارواكرول به ترتيب0/2 ±1/82 و0/07± 1/62 برابر كاهش پيدا كرد.نتيجه گيري: نتايج حاصل از اين مطالعه اثباتي براي رويكرد باليني ايمن و بهبود يافته اي از كارواكرول در درمان عفونت هاي ناشي از كانديدا و مهار تشكيل ريسه توسط آن ارائه مي دهد.

Candida albicans infection is a problem of growing clinical importance, particularly in immunocompromised populations. This study aimed to investigate the inhibitory effect of carvacrol on the hyphae formation and expression of C. albicans HWP1. METHODS: This cross-sectional study was done over a 6-month period in 2016-2017. Vaginal, mouth and skin surface swabs were obtained from immunocompromised patients. Colonizing clinical isolates of C. albicans were identified and drug susceptible isolates detected using WHONET software. The susceptibility test for carvacrol (range 6.25–300 μg/ml) were carried out with a broth microdilution according to the CLSI guidelines against drug susceptible C. albicans. The time kill assay of carvacrol (range 2 × MIC to ¼ × MIC) was determined. Hyphae inhibition was evaluated by light microscopy. We determined the expression levels of HWP1 implicated in hyphae formation of C. albicans ATCC 14053 cells by quantitative RT-PCR. FINDINGS: Ten colonizing clinical isolates of drug susceptible C. albicans were identified. Carvacrol was inhibited the growth of all drugs susceptible isolates of C. albicans (MIC range, 25-200 μg/ml). Time kill curve assay demonstrated that carvacrol could significantly inhibit the growth of C. albicans (p≤0.05). Carvacrol efficiently prevented hyphae formation in drug susceptible C. albicans. The expression levels of HWP1 gene were down-regulated by 1.82- and 1.62-fold at concentrations of 2 × MIC and 1×MIC of carvacrol, respectively. CONCLUSION: These results suggest that carvacrol could provide an improved and safe clinical approach in treating Candida infections by prevention of hyphae formation.