بررسي اثرات عصاره عناب بر آپوپتوز و تغيير بيان ژن BAX در رده‌ي سلولي سرطان سينه Sk-Br-3

Evaluating the effects of Ziziphus Jujube extract on apoptosis and BAX gene expression in Sk-Br-3 breast cancer cell line

مقدمه سرطان سينه ناشي از رشد خارج از قاعده سلول‌هاي طبيعي در پستان است. هدف اصلي اين تحقيق بررسي اثرات ضدتكثيري عصاره عناب بر رشد و تكثير رده‌ سلولي سرطاني سينه Sk-Br-3 و ارزيابي تغييرات ژن آپوپتوزي BAX بعد از تيمار مي‌باشد. مواد و روش‌­ها پس از تهيه عصاره هيدرو الكلي ميوه عناب، رده سلولي Sk-Br-3 در گروه‌هاي متفاوت با عصاره حاصل به مدت 24، 48 و 72 ساعت تيمار شدند. در ادامه با استفاده از MTT مورد سنجش قرار گرفتند و ميزان آپوپتوز ثبت گرديد. در نهايت از دو گروه كنترل و تحت تأثير قرار گرفته به مدت 24، 48 و 72 ساعت با غلظت­‌هاي 2/1 (دوز بيشتر از 1/5 ميلي­‌گرم/ميلي­‌ليتر)، 1/5 (بين تا 0/5- 1/5) و 0/7 ميلي­‌گرم/ميلي­‌ليتر (دوز كمتر از 0/5 ميلي‌­گرم/ميلي‌­ليتر) استخراج RNA انجام‌گرفت، سنتز cDNA انجام شد و با سيستم Real-Time PCR ميزان تغيير بيان ژن BAX با در نظر گرفتن ژن GAPDH به عنوان ژن سراگردان مورد بررسي قرار گرفت. يافته­‌ها با استفاده از نتايج بدست آمده از MTT، غلظت­‌هاي 2/1، 1/5 و 0/7 ميلي­‌گرم در ميلي­‌ليتر به عنوان IC50 براي زمان­‌هاي 24، 48 و 72 ساعت انتخاب شدند كه در نهايت موجب افزايش آپوپتوز شده، وابسته به زمان بوده و بيان ژن BAX را افزايش داده است. نتيجه‌­گيري در اين مطالعه براي اولين بار از عصاره هيدرو-الكلي عناب بر روي رده سلولي سرطاني سينه Sk-Br-3 استفاده شد. با توجه به نتايج به‌دست‌آمده مي‌توان عصاره هيدرو الكلي عناب را به‌عنوان پروتكل درماني رده سلولي Sk-Br-3 پيشنهاد داد.

Introduction Breast cancer originates from abnormal growth of normal cells in the chest. Like any other types of cancers, breast cancer starts with a single cell. The main aim of this study was to investigate the anti-proliferative effects of Jujube extracts on growth and proliferation of Sk-Br-3 tumor cell line and assessment of BAX expression. Materials and Methods After preparing Jujube hydro-alcoholic extract, Sk-Br-3 cell line was treated with Jujube extract in different groups for 24, 48 and 72 hours. Subsequently, it was measured by MTT assay and the rate of apoptosis was recorded. Finally, RNA was extracted from control and treated group by 2.1 (higher than 1.5 mg/ml), 1.5 (between 0.5-1.5 mg/ml) and 0.7 mg/ml (lower than 0.5 mg/ml), transformed into cDNA and the level of BAX gene expression was measured according to the GAPDH gene as a housekeeping gene by Real-Time PCR system. Results According to MTT results, 2.1, 1.5 and 0.7 mg/ml concentrations were selected as an IC50 for 24, 48 and 72 hours, which was time-dependent and has increased rate of apoptosis and BAX gene expression. Conclusion In this study, Jujube hydro-alcoholic extract was used for the first time on Sk-Br-3 cell line ever. According to the results, Jujube hydro-alcoholic extract could be suggested as the Sk-Br-3 cell line treatment protocol.