بررسي فنوتيپي و مولكولي توليد بتالاكتامازهاي وسيع الطيف (ESBLs) بين سويه-هاي اشريشياكلي جدا شده از مواد غذايي در همدان

The phenotypic and molecular analysis of the production of broad-spectrum beta-lactamases (ESBLs) among strains of Escherichia coli isolated from food in Hamedan

يكي از دلايل بروز مقاومت دارويي در ايزوله‌­هاي اشريشياكلي توليد آنزيم‌­هاي وسيع الطيف مي‌­باشد. استفاده گسترده از آنتي­بيوتيك‌­ها در صنعت كشاورزي و دامپروري، افزايش روزافزون مقاومت آنتي­‌بيوتيكي را به همراه داشته است. لذا هدف از اين پژوهش، بررسي فنوتيپي و مولكولي توليد بتالاكتامازهاي وسيع الطيف (ESBLs) در بين سويه‌­هاي اشريشياكلي جدا شده از مواد غذايي مي‌باشد. مواد و روش‌­ها اين مطالعه به صورت توصيفي-مقطعي بر روي 93 ايزوله اشريشياكلي جدا شده از مواد غذايي و ماكيان شهر همدان در سال 1396 انجام گرفت. سپس بررسي حساسيت ميكروبي ايزوله­‌هاي مولد بتالاكتاماز با استفاده از روش ديسك تركيبي (Combined teat, CT) و بر اساس دستورالعمل (2015) تعيين شد. همچنين، شناسايي مولكولي ژن­هاي توليد كننده ESBLs ( blaSHV، blaCTX-1 و blaTEM-1) با استفاده از روش PCR صورت گرفت. يافته­‌ها ارزيابي الگوي حساسيت ميكروبي نشان داد كه بيشترين مقاومت آنتي‌بيوتيكي نسبت به ناليديكسيك اسيد (88/4 درصد)، آمپي سيلين (76/8 درصد)، تتراسيكلين (82/8 درصد) و سولفومتاكسازول (67 درصد) مشاهده شد. در اين مطالعه مقاومت نسبت به سفتازيديم، سفوكسيتين، آزترونام، سفوتاكسيم مشاهده نشد. بررسي ژنوتيپي با استفاده از روش PCR نشان داد كه ميزان فراواني ژن­‌هاي blaSHV، blaCTX-1 و blaTEM-1 در ايزوله­‌هاي اشريشياكلي جدا شده از مواد غذايي به ترتيب 5/37، 19/35 و 29/03 درصد مي‌­باشد. نتيجه­‌گيري ايزوله­‌هاي اشريشيا كلي جدا شده از مواد غذايي مقاومت نسبتاً بالايي نسبت به آنتي­‌بيوتيك‌­هاي نظير آمپي سيلين، سولفومتاكسازول و تتراسايكلين از خود نشان دادند. از سويي ديگر تكنيك PCR در مقايسه با روش كشت از حساسيت بالاتري برخوردار مي‌­باشد.

One of the reasons for drug resistance in Escherichiacoli isolates is the production of broad-spectrum beta-lactamases. The widespread use of antibiotics in the agricultural and dairy industry has led to raisingin antibiotic resistance. Therefore, the aim of this study was to investigate the phenotypic and molecular ESBLs production among E. coli isolated from food. Materials and Methods This descriptive cross-sectional study was carried out by 93 E. coli isolated from food and poultry in Hamadan in 2017. Then, the microbial susceptibility of the beta-lactamase producing isolates was determined using the (Combined teat CT) method and according to CLSI (2015) guidelines. Also, molecular identification of genes producing ESBLs (blaSHV, blaCTX-1, and blaTEM-1) was performed by PCR method. Results Evaluation of microbial susceptibility showed that the highest antibiotic resistance was observed for nalidixic acid (%88.4), ampicillin (%76.8), tetracycline (%82.8), and sulfomethoxazole (%67). Resistance to ceftazidime, Cefoxitin, aztreonam, cefotaxime was not observed in this study. The genotypic study by PCR method showed that the frequency of blaSHV, blaCTX-1, and blaTEM-1genes in E. coli isolated from food (%5.37), (%19.35) and (%29.03), respectively. Conclusion E.coli isolated from food showed high resistance to antibiotics such as ampicillin, sulfomethoxazole, and tetracycline. On the other hand, the PCR method is more sensitive than the culture method.