بررسي اثر استئوكلسين بر مورفومتري بيضه در مدل آزو اسپرمي موش نژاد NMRI

The effect of osteocalcin on testis morphometry in azoospermic Syrian male NMRI

هدف از انجام اين مطالعه بررسي اثر استئوكلسين بر مورفومتري بافت بيضه در مدل آزواسپرمي موش سوري است. مواد و روش‌­ها جهت انجام اين مطالعه گروه‌­بندي بصورت زير انجام شد: گروه كنترل، گروه شم (موش‌­هايي كه (DMSO) حلال بوسولفان و سپس PBS به­ مدت پنج هفته بعنوان حلال استئوكلسين دريافت كردند) گروه آزواسپرمي-PBS (موش­هاي آزواسپرمي كه پس از 5 هفته حلال استئوكلسين به مدت يك ماه دريافت كردند). گروه آزواسپرمي- استئوكلسين (موش­‌هاي آزواسپرمي كه پس از گذشت 5 هفته از دريافت بوسولفان، به مدت 1 ماه روزانه استئوكلسين (3 نانوگرم بر گرم بر دسي ليتر) دريافت كردند). گروه آزواسپرمي (بوسولفان (40 ميلي­‌گرم/كيلوگرم بصورت تك­‌دوز) بصورت داخل صفاقي دريافت كردند، پس از آخرين تزريق بيضه­‌ها در محلول بوئن ثابت و پس از رنگ ­آميزي H&E، آزمون­‌هاي مربوط به مورفومتري صورت گرفت، سپس اطلاعات توسط نرم افزار Spss v.16 و آزمون Tukey مورد تجزيه و تحليل آماري قرار گرفتند. يافته‌­ها قطر لوله­‌هاي مني­‌ساز گروه­ استئوكلسين داراي افزايش معني‌­داري نسبت به گروه آزواسپرمي مي‌­باشند (0/05˂P). ضخامت لايه زايا گروه استئوكلسين در مقايسه با گروه آزواسپرمي افزايش معني­‌داري را نشان داد (0/05˂P). تعداد كل سلول­‌هاي لايديگ و سرتولي و شبه­ عضلاني تغييرات معني‌داري را در گروه­‌ها نشان ندادند. تعداد كل سلول­‌هاي اسپرماتوسيت، اسپرماتيد طويل و اسپرماتيد گرد و اسپرماتوگوني در گروه­‌هاي درمان­شده با استئوكلسين و در مقايسه با گروه‌­هاي آزواسپرمي و آزواسپرمي - PBS افزايش معني­‌داري را نشان داد (0/05˂P). نتيجه­‌گيري استئوكلسين مي­‌تواند اثرات مخرب بوسولفان را بر سلول­‌هاي اسپرماتوژنيك و اسپرماتوژنز بهبود بخشد.

The aim of this study was to evaluat the protective effect of osteocalcin on testis tissue in adult azoospemic mice. Method and materials 25 Adult male mice were divided into five groups: the control group received normal saline for two months, PBS- DMSO group (received DMSO and after 5weeks they received PBS for 30 days), and busulfan group received a single dose of 40mg/kg busulfan intra-peritoneally, and busulfan-PBS group received 40mg/kg busulfan and after 5 weeks PBS daily for a month, and the busulfan- osteocalcin group received 3ng/g/d osteocalcin, daily for one month, 5 weeks after a single dose of busulfan. Finally, after removal of the testis, tissues were fixed in bouin solution and stained by H&E. the sections were evaluated, and morphometric tests were done. Results No significant reduction was found in body weights of the groups, however, left testis weight in the osteocalcin group showed a significant raise in comparison with the azoospermic group (p˂0/05). Moreever, a significant increase in seminiferous tubule diameter was observed in the osteocalcin group in comparison with the control group (p˂0/05). Testicular epithelium height was significantly increased in the osteocalcin group versus the azoospermic group (p˂0/05). There weren’t any significant changes in sertoli, leidyg, myoid counting among all the groups. The total number of spermatocyte, round spermatid, elongated spermatid, and spermatogonia cells showed a significant increase in the osteocalcin group in compared to the busulfan and busulfan-PBS groups (p˂0/05). Conclusion Osteocalcin can improve the cytotoxic effect of busulfan on spermatogenic cells, also can improve spermatogenesis.