ارزيابي اثر ادجوانت آلوم و نالوكسان در واكسن HPV بر فرآيند ويرايش ايمني در ريز محيط توموري در موش

Evaluation of naloxone and alum adjuvants effect in HPV vaccine on immunoediting of mice in tumor microenvironment

زمينه و هدف: پاپيلوما ويروس، عامل بيش از نيمي از سرطان‌هاي حاصل از پاپيلوما از جمله سرطان دهانه‌ي رحم مي‌باشد. اگرچه واكسن جهت پيشگيري از سرطان‌هاي حاصل از پاپيلوما ضروري است، اما هنوز عفونت اين ويروس جزو مشكلات بهداشت جهاني محسوب مي‌گردد. ادجوانت‌ها در كنار واكسن HPV16-E7d مي‌تواند در ارتقاي سيستم ايمني مفيد باشد. هدف از انجام اين مطالعه بررسي تاثير ماده‌ي نالوكسان و آلوم به‌عنوان ادجوانت در كنار واكسن HPV16-E7d در ريز محيط توموري در موش‌هاي C57BL/6 بود. روش بررسي: مطالعه توصيفي-مقطعي كنوني در بازه زماني فروردين تا شهريور 1395 در انستيتو پاستور تهران بر روي 80 موش ماده C57BL/6 انجام گرفت. موش‌هاي توموري شده، با واكسن HPV16-E7d به‌همراه ادجوانت نالوكسان و آلوم و گروه‌هاي كنترل واكسينه شدند. سنجش تومور انجام گرفت. هموژنات تومور تهيه شد و سپس سايتوكين‌هاي IL-17, IL-4, IFN-γ, TGF-β با روش ELISA Capture مورد بررسي قرار گرفت. يافته‌ها: اين پژوهش نشان مي‌دهد كه در موش‌هاي مورد آزمايش با ادجوانت نالوكسان و هيدروكسيد آلومينيوم (آلوم) به‌همراه واكسن HPV16-E7d در موش‌هاي C57BL/6 به‌طور معناداري باعث كاهش نسبي رشد تومور (0.0001≤P) شده و پاسخ ايمني سلولي در ريز محيط توموري را نسبت به گروه‌هاي كنترل تقويت مي‌نمايد. نتيجه‌گيري: پ‍‍ژوهش كنوني بيانگر ايمني‌زايي بيشتر واكسن ضد پاپيلوماي ويروس HPV16-E7d فرموله شده با ماده‌ي نالوكسان و آلوم به‌عنوان ادجوانت، در مقايسه با گروه كنترل فسفات بافر سالين، در واكسن پاپيلوماي ويروس در ريز محيط توموري در موش‌هاي ماده C57BL/6 مي‌باشد.

Background: Papilloma viruses are pathogenic double-strand DNA viruses that genotypes 16 and 18 are the cause of more than 50 percent of cancers as cervical cancer. Although vaccination is one of the best options for the papilloma cancer prevention but that is the most of world healthy problem, it is attempted to evaluate both naloxone (NLX) and alum mixture used as adjuvants together with HPV16 E7d vaccine to change the tumor microenvironment for the benefit of the immune system. The aim of this study was to investigate the effect of naloxone and alum mixture as adjuvants in HPV16 E7d vaccine on C57BL/6 female mouse in tumor microenvironment. Methods: This study is a descriptive and cross-sectional study type, which was conducted on 80 case of C57BL/6 female mouse in Pasteur institute of Iran, Tehran over a period of six months in 2016. In this study, mice were vaccinated with dose of vaccine containing naloxone and alum mixture and alum as adjuvants and proper phosphate buffered saline (PBS) as control groups are considered. Tumor bearing mouse vaccinated by vaccine containing naloxone and alum mixture as adjuvants and phosphate buffered saline (PBS) as control group. Tumor model created through surgery and then tumor measurement done, the homogenate was created and protein concentration measured by Bradford system. Finally, assessment of IL-17, IL-4, IFN-γ and TGF-β cytokines concentration were performed by capture ELISA kit (mybiosource company) according to the company manual. Results: It was observed that utilization of naloxone and alum mixture as adjuvant in the HPV16-E7d vaccine formulation significant reduction in the tumor growth (P≤0.0001) and reinforced meaningfully the cellular immunity reaction in tumor microenvironment. Conclusion: The results of our study show that vaccine formulated with the naloxone and alum mixture as adjuvant in the HPV16 -E7d vaccine increase the cellular immunity reaction on C57BL/6 female mouse in tumor microenvironment compared to phosphate buffered saline (PBS) control group in this new formulation as a papilloma viruses vaccine on C57BL/6 female mouse