بررسي فنوتيپي و مولكولي توليد بيوفيلم در استرپتوكوكوس موتانس هاي ايجاد كننده پلاك دنداني

Evaluation of phenotypic and molecular analysis of biofilm production in stereptococcus mutants producing dental plaque

مقدمه: پوسيدگي دندان يكي از مهم ترين معضلات جوامع مي باشد. فعاليت باكتريهاي توليد كننده ي اسيد به ويژه بيوفيلم هايstreptococcus mutants اصلي‌ترين عامل ايجاد كننده‌ي اين عارضه محسوب مي‌شود. ايجاد بيوفيلم هاي باكتري مذكور منوط به حضور آنزيمي ويژه به نام گلوكان سوكراز يا گلوكوزيل ترانسفراز است كه توسط ژن gtf كد مي شود. هدف از اين مطالعه بررسي ژن هاي مؤثر gtfB و gtfC باكتري streptococcus mutants در تشكيل بيوفيلم پلاك دنداني مي باشد. مواد و روش ها: در بررسي بيوفيلم با استفاده از روش پليت ميكروتيتر بر روي سطوح پلي استيرني تشكيل گرديد استخراج DNA با استفاده از كيت باكتريهاي گرم مثبت سيناژن (Cinna Pure DNA KIT-PR881614) صورت گرفت. جهت بررسي محصول PCR، نمونه ها بر روي ژل آگارز 1درصد منتقل شد .pH بهينه و تاثير غلظت هاي مختلف ساكارز بر رشد باكتري به روش كدورت سنجي در طول موج 630 نانومتر با دستگاه اسپكتروفتومتر اندازه گيري شد. نتايج: يافته ها نشان داد از 46 نمونه مورد مطالعه 19 جدايه (30/41 درصد) واجد ژن gtfB و 8 مورد (4/17 درصد) واجد ژن gtfC بودند. ميزان جذب نوري بيوفيلم توليدي توسط نمونه ها با يكديگر متفاوت بوده و بيشترين ميزان جذب 43/1 ميباشد. در اين مطالعه بيشترين ميزان رشد باكتري stereptococcus mutants جداشده از پلاك دندان در غلظت 5/0 گرم بر ليتر ساكارز و 5/4 =pH حاصل شد. بحث و نتيجه گيري: بنابراين قند ساكارز كه قند معمول موجود در رژيم غذايي است سبب رشد باكتري stereptococcus mutants، كه عامل اصلي پوسيدگي دندان است، مي شود.

Tooth decay is one of the most important problems societie. the activity of acid producing bacteria, especially Streptococcus mutans, is the main cause of this complication. The creation of the biofilms of the bacterium is subject to the presence of a specific enzyme called glucan sucrase or glucosyltransferase, coded by gtf gene. The aim of this study was to evaluate the genes of GtfB and GtfC of Streptococcus mutans in the formation of dental plaque biofilm. Material & Mthod: . In study, the biofilm was formed on a polystyrene surface using a microtiter plate and stained. In order to confirm Streptococcus mutans colonies, biochemical and fermentative tests were performed. DNA extraction from the kit of gram-positive bacteria (Cinna Pure DNA KIT-PR881614) was used to extract DNA. To evaluate the PCR product, the samples were transferred to 1% agarose gel examined staining. optimum pH and the effect of different concentrations of sucrose on bacterial growth were measured at 630 nm using spectropHotometer. Results: The results showed that out of 46 samples, 19 isolates (41.30%) had gtfB gene and 8 (17.4%) had gtfC gene. The absorbance of the biofilm produced by the samples is different and the highest absorption is 1.43. In this study, the highest growth rate of Streptococcus mutans isolated from tooth plaque was obtained at a concentration of 0.5 g / L sucrose and pH = 4.5. Conclusion: Therefore, sucrose sugar, which is commonly found in the diet, causes the growth of Streptococcus mutans .