بررسي شيوع مقاومت آنتي بيوتيكي استافيلوكوك اورئوس مقاوم به متي سيلين(MRSA) و تعيين ژن مقاومت به آمينو گليكوزيدaac(6΄)-Ie/aph(2˝) جدا شده از بيماران بستري در بيمارستان هاي امام حسين، لقمان حكيم و پارس تهران به روش PCR

The Prevalence of Antibiotic Resistance in Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus and the Determination of Aminoglycoside Resistance Gene aac(6΄)-Ie/aph (2˝) Isolated from Hospitalized Patientsin Imam Hossein, Loghman Hakim, and Pars Hospitals in Tehran using Polymerase chain Reaction

مقدمه: استافيلوكوك اورئوس يكي از مهم ترين عوامل عفونت هاي منشاء گرفته از جامعـــه و منــــشاء گرفتـــــه از بيمارســــتان را پديد مي آورد. آمينوگليكوزيدها عوامل باكتري كش قدرتمندي هستند كه اغلب به صورت تركيبي همراه با بتالاكتام ها يا گليكوپپتيدها در درمان عفونت هاي استافيلوكوكي مصرف مي شوند. هدف اصلي تحقيق حاضر تعيين فراواني ژن aac(6΄)-Ie/aph(2˝) كدكننده يكي از مهم ترين آنزيم هاي تغييردهنده آمينوگليكوزيدها به همراه ژن mecA كه موجب مقاومت به متي سيلين مي شود، به روش ديسك ديفيوژن و PCR در ايزوله هاي باليني MRSA است. مواد و روش ها: در اين مطالعه 174 ايزوله MRSAجدا شده از نمونه هاي مختلف باليني نظير خون، خلط، اگزداي تراشه، برونش، پلور، ادرار، زخم و كتتر، براي تعيين مقاومت دارويي آنتي بيوتيك هاي اريترومايسين، كليندامايسين، سيپروفلوكساسين، جنتامايسين، سفازولين، ريفامپين، داكسي سيكلين، كوتريموكسازول و ونكومايسين با روش انتشار ديسك كربي-بائر با توجه به رهنـــمــــون هاي CLSI مورد بررسي قرار گرفتند. وجود استافيلوكوك اورئوس مـــقاوم به متي ســـيلين با گزاشتن ديسك هاي آنتي بيوتيكي اگزاسيلين و سفوكسيتين بررسي و تاييد شد. سپس DNA ايزوله هاي MRSA براي يافتن ژن هاي mecA و ژن مقاومت به آمينوگليكوزيدهاaac(6΄)-Ie/aph(2˝) توسط روش PCR مورد بررسي قرار گرفت. يافته هاي پژوهش: نتايج آنتي بيوگرام نشان داد تمامي سويه ها به اگزاسيلين و سفوكسيتين مقاوم بودند و پس از آن بيشترين مقدار مقاومت به اريترومايسين با 8/84 درصد مشاهده شد. هم چنين تمام ايزوله ها به ونكومايسين حساس بودند. با انجام PCR100 درصد سويه ها از نظر ژن mecA و 3/78 درصد سويه ها از نظر حضور ژنaac(6΄)-Ie/aph(2˝) مثبت بودند. بحث و نتيجه گيري: بررسي ها نشان داد كه در ايزوله MRSA درصد شيوع ژن هاي مقاومت به آمينوگليكوزيدها بسيار زياد مي باشند.

ntroduction: Staphylococcus aureus is one of the critical pathogens resulted in hospital land community-acquired infections. Aminoglycosides are potent bactericidal agents that are often used in staphylococcal infection treatment in combination with a beta-lactam or glycopeptide antibiotics. The aim of this study was to determine the frequency of encoding gene ofaac (6΄)-Ie/aph (2˝).This gene is one of the important aminoglycoside modifying enzymes in combination with mecA which results in methicillin resistance. In doing so, disk diffusion and polymerase chain reaction (PCR) methods were utilized in clinical isolates of methicillin resistant staphylococcus aureus (MRSA). Materials & Methods: In the current study, 174 clinical isolates of MRSA were obtained from different clinical specimens, including blood, sputum, trachea, brunch, pleura, urine, wound, and catheter. Antibiotic resistance of erythromycin, clindamycin, ciprofloxacin, gentamicin, cefazolin, rifampicin, doxycycline, cotrimoxazole and vancomycin was determined using Kirby-Bauer disk diffusion test method according to the CLSI guidelines. The presence of MRSA was confirmed using oxacillin and cefoxitin anti biotic disc diffusion. Subsequently, DNA of MRSA isolates was investigated to detect mecA and aminoglycoside resistance aac (6΄)-Ie/aph (2˝) genes using PCR. Findings: The results obtained from biogram anti-microbial susceptibility test system indicated that all of the isolates were resistant to oxacillin and cefoxitin. All of the isolates were sensitive to vancomycin and majority of them were resistant to erythromycin (84.8%). According to PCR test results, 100 and 78.3% of the isolates were positive for the mecA and aac(6′)/aph(2˝)-Ia genes, respectively. Discussion & Conclusions: According to the results, the aminoglycoside resistance geneswere highly prevalent in MRSA isolates.