كاهش بيان ژن هاي TNF-α، IL-1β، COX-2 و كاهش توليد PGE2 وNO در كندروسيت هاي مفصلي و مونوسيت/ماكروفاژ توسط عصاره آبي گياه خارشتر Alhagi maurorum L.

Reduced TNF-α, IL-1β and COX-2 Expressions and Decreased Production Rate of PGE2 and NO in Articular Chondrocytes of Monocyte/Macrophage using the Aqueous Extract Alhagi Maurorum L.

مقدمه: امروزه بيماري استئوآرتريت(آرتروز) را يك بيماري دژنراتيو نمي دانند با توجه به عوارض جانبي مانند زخم هاي پپتيك، مسموميت هاي كبدي و عوارض كليوي ناشي از درمان داروهاي كورتون و غير استروئيدي، استفاده از گياهان دارويي به عنوان يك درمان جايگزين پيشنهاد مي شود. گياه خارشتر Alhagi maurorum L. به طور معمول در طب سنتي به عنوان يك درمان براي دردهاي روماتيسمي استفاده مي شود. بنا بر اين اين تحقيق با هدف اندازه گيري كاهش بيان ژن هاي TNF-α، خارشترAlhagi maurorum L. انجام گرفت. مواد و روش ها: عصاره آبي گياه خار شتر از مركز ذخاير ژنتيكي تهيه گرديد. براي تهيه سلول ها مفصل و مايع مفصلي متاكارپ اندام حركتي قدامي گوساله 8 ماهه هلشتاين كاملاً سالم، بلافاصله بعد از كشتار داخل كيسه استريل به آزمايشكاه ارسال گرديد. سلول هاي THP-1 به صورت فلاسكي حاوي 6x106 و60 ميلي ليتر محيط كشت غني شده از انستيتو پاستور تهيه گرديد. هر يك از انواع سلول ها در شرايط مناسب كشت داده شد و viability آن ها با روش تريپان بلو ارزيابي شد و پس از تكثير و به منظور افزايش سطح سايتوكين ها به وسيله ليپوپلي ساكاريد(LPS) تيمار شدند. بعد از كشت مجدد سلول ها در دماي 37 درجه سانتي گراد در انكوباتور CO2 دار با رطوبت 90 درصد براي مراحل بعدي نگهداري شد. پس ازجداسازي RNA و تهيه cDNA انجام RT-PCR & PCR و سپس با استفاده از روش Real Time-PCR به بررسي ميزان بيان ژن هاي مورد نظر پرداخته شد. يافته هاي پژوهش: بيان ژن COX-2 به ميزان 59/36 درصد توسط عصاره آبي گياه خار شتركاهش يافت. بيان ژن IL-1β به ميزان 50 درصد توسط عصاره آبي گياه خار شتركاهش يافت. بيان ژن TNF-α به ميزان 86/51 درصد توسط عصاره آبي گياه خار شتركاهش يافت و توليد No و PGE-2 دراثر عصاره آبي خارشتر به ترتيب به ميزان 48 درصد و 52 درصد كاهش يافت. بحث و نتيجه گيري: عصاره آبي گياه خار شتر منجر به كاهش بيان ژن CoX-2 و iNOS در سلول هاي ساينوويوسيت تحريك شده

Introduction: Nowadays, osteoarthritis is not considered as a degenerative disease. Regarding the side effects, such as peptic ulcers, liver toxicity, and renal complications due to the use of corticosteroids and non-steroid drugs, it is recommended to utilize medicinal plants as an alternative treatment. Alhagi Maurorum. L is commonly used in traditional medicine as a treatment for rheumatic diseases. Therefore, this study aimed to evaluate the reduction of TNF-α, IL-1β, and COX-2 gene expressions and decreased production rate of PGE2 and NO in chondrocytes of monocyte/macrophages by the aqueous extract of Alhagi maurorum.L. Materials & Methods: The aqueous extract of Alhagi maurorum. L was prepared from genetic reserves. For the preparation of the cells, the joint and the subcutaneous fluid of the anatomical metacarpal of the 8-month-old fully healthy Holstein calf were sent in a sterile bag to the laboratory immediately after the slaughter. The THP-1 cells were prepared in a flask containing 6x106 and 60 ml of enriched culture media from Pasteur Institute. Each cell type was cultured in appropriate conditions and the viability was evaluated by trypan blue. After proliferation, they were treated with lipopolysaccharide to increase the level of cytokines. After re-culture of the cells at 37 ° C in a CO2-incubator with a moisture content of 90%, they were stored for the next steps. After the RNA priming and cDNA preparation, RT-PCR and PCR were performed and then the real-time- polymerase chain reaction method was used to determine the expression of the desired genes. Findings: According to the results, the COX-2, IL-1β, and TNF-α gene expressions reduced by 36.59%, 50%, and 51.86%, respectively, using the aqueous extract of Alhagi maurorum. L. In addition, there was a reduction in the production rate of No and PGE-2 by 48% and 52%, respectively. Discussion & Conclusions: The aqueous extracts of Alhagi maurorum. L reduced CoX-2 and iNOS gene expression in LPS-stimulated synoviocyte cells. In addition, there was a decrease in the production of NO and PGE2 in THP-1 cells.