عنوان مقاله :
بررسي قابليت توليد سلول هاي پرتوان القايي از نمونه هاي زنوگرفت سرطان پانكراس انسان
عنوان به زبان ديگر :
Investigation the Ability to Produce Induced Pluripotent Cells from Human Pancreatic Cancer Xenografts
پديد آورندگان :
خوش چهره، ريحانه پژوهشگاه رويان، تهران - پژوهشكده زيست شناسي و فنآوري سلولهاي بنيادي جهاد دانشگاهي - گروه سلولهاي بنيادي و زيست شناسي تكويني , توتونچي، مهدي پژوهشگاه رويان، تهران - پژوهشكده زيست شناسي و فنآوري سلولهاي بنيادي جهاد دانشگاهي - گروه سلولهاي بنيادي و زيست شناسي تكويني , بهاروند، حسين پژوهشگاه رويان، تهران - پژوهشكده زيست شناسي و فنآوري سلولهاي بنيادي جهاد دانشگاهي - مركز تحقيقات پزشكي توليد مثل - گروه ژنتيك , ابراهيمي، مرضيه پژوهشگاه رويان، تهران - پژوهشكده زيست شناسي و فنآوري سلولهاي بنيادي جهاد دانشگاهي - گروه سلولهاي بنيادي و زيست شناسي تكويني
كليدواژه :
زنوگرفت حاصل از نمونه بيمار , سلولهاي iPS , سلول هاي سرطاني پانكراس
چكيده فارسي :
زمينه و هدف: شواهدي وجود دارد كه سلولهاي سرطاني در طي فرآيند شكلگيري و پيشرفت سرطان، ناهنجاريهاي اپيژنتيكي را نيز علاوه بر جهش هاي ژنتيكي چندگانه متحمل ميشوند. استفاده از فنآوري بازبرنامه ريزي به عنوان ابزاري براي اعمال «فشار» و ايجاد تغييرات در تنظيم‌كننده هاي اپيژنتيكي، ميتواند به روشن كردن رفتار اپيژنتيكي منحصر به سلولهاي سرطاني منجر شود. تاكنون، سلولهاي iPS از سلولهاي پرايمري نرمال توليد شده اند، اما مشخص نيست كه آيا سلول سرطاني اوليه انساني نيز ميتواند به سلول iPS باز‌برنامه‌ريزي شود يا خير. در اين مطالعه، توليد سلولهاي iPS از سلولهاي آدنوكارسينوماي پانكراس با استفاده از عوامل رونويسي مورد بررسي قرار داديم.
مواد و روش‌ها: سلولهاي حاصل از نمونههاي زنوگرفت PDAC انساني، با لنتي ويروس حاوي عوامل Yamanaka (OSKM) القا شده و در ادامه سلولهاي القا شده توسط رنگآميزي آلكالين فسفاتاز، Real-Time PCR و ايمونوسيتوشيمي تعيين هويت شدند.
ملاحظات اخلاقي: مطالعه حاضر با كد اخلاقي EC/93/1025 در كميته اخلاق پزشكي پژوهشگاه رويان پذيرفته شده است.
يافته‌ها: رنگآميزي آلكالين فسفاتاز، Real-Time PCR و ايمونوسيتوشيمي نشان داد كه القاء با عوامل رونويسي OSKM منجر به توليد سلولهاي iPS از سلولهاي فيبروبلاستي ميشود، اما نه از سلولهاي PDAC PDX. سلولهاي PDAC نميتوانند به‌طور كامل با بيان چهار عامل رونويسي مجدد برنامهريزي شوند.
نتيجه‌گيري: اين مطالعه نشان داد كه سلولهاي سرطاني PDAC-PDX، با توجه به الگوي بيان ژن‌هاي اصلاح‌كننده اپيژنتيكي آن‌ها، از سلولهاي القاشده PDAC متفاوت بودند، هرچند بيان ژن‌هاي تكامل يافته در سلولهاي PDAC القاشده به‌طور قابل توجهي افزايش نيافت.
چكيده لاتين :
Background and Aim: There is increasing evidence that cancer cells in addition to multiple genetic mutations, also acquire epigenetic abnormalities during development, maintenance, and progression. By utilizing the reprogramming technology as a tool to introduce the ‘pressure’ to alter epigenetic regulations, we might be able to clarify the epigenetic behavior that is unique to cancer cells. So far, iPSCs have been generated from normal primary cells, but it is unclear whether human primary cancer cell can be reprogrammed. We investigated the production of the iPS cells from the pancreatic adenocarcinoma cells using defined transcription factors. Materials and Methods: We sought to reprogram patient derived xenograft from human PDAC, by introducing lentiviral mediated induction of Yamanaka Factors (OSKM) and characterized of induced cells by Alkaline Phosphatase staining, Real-Time PCR and immunostaining. Ethical Considerations: This study with research ethics code EC/93/1025 has been approved by research ethics committee at Royan Institute. Findings: Alkaline Phosphatase staining, Real-Time PCR and immunostaining showed that induction with the OSKM results in generating iPS cell line from fibroblast cells but not from PDAC PDX cells .We showed that, PDAC cells could not fully reprogrammed by the expression of 4 transcription factors. Conclusion: This study demonstrated that the PDAC-PDX cancer cells were distinct from PDAC induced cells with regard to their epigenetic modifier genes expression pattern, although the expression of pluripotency genes did not increased significantly in the induced PDAC cells.
عنوان نشريه :
مجله دانشگاه علوم پزشكي اراك
