ارزيابي اثرات بنزوآريك اسيد بر كمپلكس مهاركننده كاپا بي/ فاكتور هسته‌اي كاپا بي و بيان كاسپازهاي 8 و 9 در مدل حيواني مالتيپل اسكلروزيس

Evaluation of Effects of Benzoaric Acid on the I-kB/NF-kB Complex and Expression of Caspase-8 and -9 in Animal Model of Multiple Sclerosis

زمينه و هدف: با توجه به اهميت معرفي تركيبات جديد جهت كنترل و يا درمان بيماري ام اس، در اين پژوهش اثرات تركيب طبيعي بنزوآريك اسيد (BA) بر التهاب و آپوپتوز ‌سلول‌هاي مغزي در مدل حيواني ام اس ايجاد شده توسط كوپريزون بررسي گرديد. مواد و روش‌ها: در مطالعه تجربي حاضر، تعداد 35 سر موش بالغ نر نژاد C57BL/6 به پنج گروه تقسيم شدند شامل: كنترل) با مصرف شش هفته غذاي معمولي پودر شده به‫همراه تزريق داخل صفاقي روزانه 100 ميكروليتر حلال بنزوآريك اسيد (بافر فسفات نمكي)‫ در دو هفته آخر، كوپريزون) با مصرف شش هفته غذاي پودر شده حاوي 2/0 درصد كوپريزون به‫همراه تزريق داخل صفاقي حلال بنزوآريك اسيد در دو هفته آخر و كوپريزون درمان) سه گروه كوپريزون كه در دو هفته آخر بنزوآريك اسيد با دوزهاي 20، 40 و 80 ميلي‫گرم بر كيلوگرم را دريافت كردند. درنهايت، ناحيه مديال كورپوس كالوزوم مغز حيوانات توسط آزمايشات وسترن بلات و روش مولكولي ريل تايم پي سي ار مورد ارزيابي قرار گرفت. ملاحظات اخلاقي: رعايت نكات اخلاقي با توجه به موازين كميته اخلاق و منطبق با منشور اخلاقي هلسينكي در مورد كليه حيوانات جهت به حداقل رساندن آزار به حيوانات صورت گرفت (UOZ-GR-9517-13). يافته‫ها: تجزيه و تحليل‌هاي مولكولي نشان داد بنزوآريك اسيد 80 با كاهش بيان mRNA (01/0> p) و پروتئين مولكول التهابي فاكتور هسته‫اي كاپا‫بي، باعث افزايش نسبت پروتئيني مهاركننده كاپا‫بي به فاكتور هسته‫اي كاپا‫بي (05/0> p) در مقايسه با گروه كوپريزون و كاهش التهاب مي‫گردد. هم‌چنين، بنزوآريك اسيد 80 با كاهش بيان mRNA كاسپاز 9 (01/0> p) و كاسپاز 8 (05/0> p) نسبت پروتئين كاسپاز 8 به كاسپاز 9 را در مقايسه با گروه كوپريزون افزايش داده (01/0> p) و باعث كاهش القاي آپوپتوز مي‫گردد. نتيجه‌گيري: دوز 80 ميلي‫گرم بر ميلي‫ليتر بنزوآريك اسيد با كاهش التهاب و آپوپتوز القاشده توسط كوپريزون داراي اثرات حفاظتي است.

Background and Aim: Regarding the importance of new treatments to control and treat multiple sclerosis (MS), in this study we investigated the role of Benzoaric acid (BA) on the neuro-inflammation and apoptosis processes in the cuprizone (cup)-induced animal model of MS. Materials and Methods: In this experimental study, 35 males C57BL/6 mice were divided into five groups. The study groups were included, control: received six weeks of normal powdered food beside intraperitoneal (i.p.) injection of BA solvent (100 μL per day PBS) for the last two weeks, cup: received six weeks of powdered food contains 0.2% cup beside i.p. injection of BA solvent for the last two weeks and cup-treatment: received six weeks of powdered food contains 0.2% cup beside i.p. injection of 20, 40 and 80 mg/kg BA for the last two weeks. Eventually, the medial corpus callosum area of the animal’s brain was evaluated via western blot and Real-Time PCR methods. Ethical Considerations: Ethical points were observed according to the declaration of Helsinki and relevant code of ethics, regarding minimizing harms during animal experimentation (UOZ-GR-9618-5). Findings: Molecular studies have shown that BA-80 decreased mRNA (p <0.01) and protein expression of NF-KB and consequently increased I-KB/NF-KB ratio (p <0.05) and decreased inflammation in compare to cup group. Moreover, BA-80 decreased caspase-9 mRNA (p<0.01) and caspase-8 mRNA (p <0.05) and subsequently increased caspase-8/caspase-9 ratio (p<0.01) and decreased apoptosis in compare to cup group. Conclusion: The dose of 80 mg/ml BA via decreasing cup-induced neuro-inflammation and neuro-apoptosis has protective effects in this model.