بررسي اثر ضدباكتريايي نانوذرات كيتوزان بارگذاري شده با آموكسي سيلين و كلاولانيك اسيد بر سويه هاي استافيلوكوكوس اورئوس مقاوم به متي سيلين

Antibacterial Effects of Chitosan Nanoparticles Loaded with Amoxicillin and Clavulanic acid against Methicillin Resistant Staphylococcus aureus Strains

مقدمه: نانوذرات حامل آنتي بيوتيك مي توانند اثرات سيتوتوكسيك بر باكتري هاي مقاوم به دارو داشته باشند. هدف از اين مطالعه بررسي اثر نانوذرات كيتوزان حامل آموكسي سيلين و كلاولانيك اسيد بر زنده ماني سويه هاي MRSA استافيلوكوكوس اورئوس مي باشد. مواد و روش ‌ها: در اين مطالعه نانوذرات كيتوزان با روش ژلي شدن ساخته و سپس آموكسي سيلين و كلاولانيك اسيد بر روي آن بارگذاري شد و نانوذراتي با ابعاد كمتر 100 نانومتر به دست آمد. جهت بررسي تاثير غلظت هاي مختلف نانوذرات بر باكتري ها به روش مايكرودايلوشن غلظت هاي متوالي 8-25/0 از نانوكيتوزان و غلظت هاي متوالي 128-1 از آموكسي سيلين تهيه شد. 100 ميكروليتر از غلظت هاي مختلف نانو كـــيتوزان حاوي آنتي بيوتيك به هر چاهك انتقال يافت. يك ميكروليتر از سوسپانسيون باكتري به آن اضافه گرديد. كدورت سنجي در چاهك ها به صورت چشمي مشاهده و جذب نوري در طول موج 630 نانو متر توسط دستگاه الايزا ريدر خوانده شد. يافته ‌هاي پژوهش: نتايج به دست آمده نشان مي دهد كه حداقل غلظت مهاركنندگي نانوذرات كيتوزان حامل آموكسي سيلين و كلاولانيك اسيد در نمونه حساس 9/0 ميكروگرم بر ميلي ليتر و در نمونه مقاوم 6/3 ميكروگرم بر ميلي ليتر و حداقل غلظت كشندگي آن ها به ترتيب 8/1 و 2/7 ميكروگرم بر ميلي ليتر به دست آمد. بحث و نتيجه گيري: بر اساس نتايج به دست آمده تركيب حاصل، در مقايسه با كيتوزان و نيز آموكسي سيلين تنها، فعاليت ضد ميكروبي بيشتري دارد كه اين نشان دهنده اثر هم افزايي آموكسي سيلين به همراه كلاولانيك اسيد و كيتوزان است.

Introduction: Antibiotic-carrying nanoparticles have cytotoxic effects on drug-resistant bacteria. The aim of the present study was to evaluate the effect of chitosan nanoparticles carrying amoxicillin and clavulanic acid on the viability of staphylococcus aureus strains. Materials & Methods: In this study, chitosan nanoparticles were prepared by ionic gelation method and were loaded by amoxicillin and clavulanic acid leading to the production of nanoparticles with dimension less than 100 nm. To evaluate the effect of different nanoparticle concentration on the bacteria, chitosan and amoxicillin concentrations of 0.25-8 and 1-128 µg/ml were prepared, respectively, using the microdilution method. Subsequently, 100 nm of different chitosan nanoparticle concentration with antibiotic was transferred to each well and 1 μl of bacterial suspension was added to the wells. Turbidity in the wells was observed without armed eye and the light absorbance was read in the wavelength range of 630 nm by enzyme-linked immunosorbent assay. Findings: The results showed that minimum inhibitory concentrations of chitosan nanoparticles carrying amoxicillin and clavulanic were 0.9 and 3.6 µg/ml in susceptible and resistant specimens, respectively. Moreover, their minimum destructive concentrations were obtained at 1.8 and 7.2 µg/ml, respectively. Discussion & Conclusions: According to the results, the obtained combination showed more antibacterial effectiveness, compared to chitosan and amoxicillin alone. This reveals the synergistic effect of amoxicillin with clavulanic acid and chitosan.