مطالعه تاثير استوباكتر جداسازي شده از ترشيجات محلي در مسير سيگنالينگ سلولي PTEN/AKT در سلول هاي سرطاني كولون HT29

The Study of the Effects of Acetobacter Isolated from Local Picklesin PTEN/AKT Signaling Route in Colon Cancer Cells (HT29)

مقدمه: برهم خوردن بالانس اكوسيستم ميكروبي، باعث تغييرات بيولوژيكي در ارتباط با سرطان كولوركتال و تكثير سلولي و مرگ برنامه ريزي شده آن ها و نيز پاسخ هاي ايمني مي گردد. هدف از اين مطالعه تعيين تاثير باكتري هاي پروبيوتيك بر بيان ژن هاي مرتبط با رشد، متاستاز و آپوپتوزدر سلول هاي سرطاني كولون HT29 مي باشد. مواد و روش ها: در طول اين مطالعه ابتدا باكتري هاي پروبيوتيك استوباكتر كشت داده شدند و پس از تهيه كانديشن مديا بر روي سلول هاي سرطان HT29 تيمار شدند. با استفاده از روش MTT assay مورد بررسي قرار گرفت. استخراج DNA از سلول هاي تيمار شده انجام شد و تست DNA Ladder assay صورت گرفت. پس از استخراج RNA و تهيه cDNA، بيان ژن هاي مرتبط با رشد(AKT1 و PTEN) و نيز ژن مسير آپوپتوز(BAX) به روش Real-time PCR مورد سنجش قرار گرفت. يافته هاي پژوهش: نتايج حاصل از آزمايشMTT نشان داد كه باكتري هاي استوباكتر تكثير سلول هاي HT-29 را مهار نموده و سبب القاء آپوپتوز در اين سلول ها مي شوند. نتايج DNA ladder assayحاصل از تيمار سلول هاي HT29 با باكتري هاي ذكر شده تغييرات كيفي آپوپتوز سلولي را نشان داد. علاوه بر اين نتايج Real-time PCR نشان داد كه باكتري هاي استوباكتر سبب افزايش بيان ژن هاي(BAX، PTEN) در سلول هاي سرطاني كولون HT29 شد. بحث و نتيجه گيري: استوباكتر مسير سيگنالينگ سلولي آپوپتوز در سلول هاي سرطاني كولون HT29 را تحريك نموده و مي توان در جهت استراتژي جديد درماني و يا اجوانت تراپي براي تيمار سرطان كولون استفاده نمود.

Introduction: The imbalance of the microbial ecosystem causes biological changes associated with colorectal cancer and cell proliferation and their planned death, as well as the immune responses. The aim of this study was to determine the effect of probiotic bacteria on the expression of genes associated with growth, metastasis and apoptosis in cancer cells of the HT29 colon. Materials & Methods: During this study, probiotic Acetobacter were cultured and treated with HT29 cancer cells after preparation of media. The MTTassay method was investigated. DNA extraction from the treated cells was performed and the DNA Ladder assay test was performed. After extraction of RNA and preparation of cDNA, the expression of genes related to growth (AKT1 and PTEN) and apoptosis pathway gene (BAX) was measured by Real-timePCR. Findings: The results of the MTT assay showed that the Acetobacter bacteria inhibited the proliferation of HT-29 cells and induced apoptosis in these cells. The DNA ladder assay results from treatment of HT29 cells with these bacteria showed qualitative changes in cell apoptosis. In addition, the results of Real-time PCR indicated that the bacterial strains increased the expression of BAX (PTEN) genes in the cancer cells of the HT29 colon. Discussion & Conclusions: Acetobacter stimulates cellular apoptosis signaling pathway in cancer cells of the HT29 colon and it can be used as an adjuvant therapy in colon cancer treatment or in new treatment strategies.