آناليز پروتئوميكس افتراقي (دوبعدي) رده سلولي سرطاني پروستات تحت تاثير آنتي اكسيدان طبيعي اولئوروپين زيتون

Differential Proteomics analysis (2D) of prostate cancer cell lines under the treatment of natural antioxidant Oleuropein

زمينه سرطان پروستات شايع‌ترين سرطان بدخيم در مردان است. شناخت ماهيت و روند سرطان و مكانيزم‌هاي مهار آن همواره از موضوعات مهم و مطرح در علم مي‌باشد. هدف از اين پژوهش بررسي مكانيزم اثر اولئوروپين موجود در عصاره زيتون بر روي ميزان بيان پروتئين‌هاي رده سلولي سرطاني پروستات LNcap مي‌باشد. روش‌ كار آزمون زنده ماني (MTT) در 8 سطح اولئوروپين ppm 2500 و1250، 625، 312، 156، 78، 39 و 19 در رده‌ي سلولي LNcap، در قالب طرح CRD اعمال و آناليز پروتئوميكس مقايسه‌اي افتراقي انجام شد. نتايج الكتروفورز دو بعدي براي پروتئين‌هاي افتراقي از طريق MS- MALDI-TOF-TOF و Align آن‌ها در Database Mascot مورد شناسايي قرار گرفتند. يافته‌ها نتايج آزمون زنده ماني نشان مي‌دهد اولئوروپين زيتون مي‌تواند رشد سلول‌هاي سرطاني LNCap را كنترل و ميزان گردشدگي سلول‌ها را افزايش دهد. بيشترين ميزان اين كنترل رشد در غلظت ppm 625 بوده است كه در اين دز بيشترين القاي اپاپتوز اتفاق افتاده بود. پروتئين‌هاي GSTP1 و DMNT1 به عنوان پروتئين‌هاي افتراقي در اثر تيمار با اولئوروپين نسبت به شاهد شناسايي شدند، به‌طوري كه با اعمال تيمار ppm625 اولئوروپين پروتئين DNMT1 نسبت به نمونه شاهد كاهش بيان (Down Regulate) و GSTP1 افزايش بيان (Up Regulate) داشت. نتيجه‌گيري اولئوروپين از طريق اعمال تغيير بر بيان پروتئين‌ها، افزايش بيان ژن‌هاي آنتي‌اكسيدان، بيان برخي فاكتور‌هاي رونويسي، هدايت سلول‌ها به مسير اپاپتوز و كاهش فعاليت‌هاي متاستازي، در مهار سلول‌هاي سرطاني پروستات رده LNcap موثر بوده است.

Background Prostate cancer is the most common cancer in men. Identification of cancer nature, progress and the mechanism of its inhibition have been always scientific important issues. The aim of this study was to analyze the effect of olives Oleuropein particles on protein expression levels in prostate cancer cell line, LNcap. Methods Survival test (MTT) has been applied in 8 concentrations of Oleuropein: 19, 39, 78, 156, 312, 625, 1250, and 2500 in LNcap cell line, as well differential comparative proteomics analyses has been performed. Two dimensional electrophoresis results in relation to differential proteins have been identified by MS- MALDI-TOF-TOF approach, as their aligns have been recognized in Mascot Database. Results Survival test demonstrates that olive Oleuropein controled LNCap cells growth and increased their roundness. LNCap cells have most been controlled in 625ppm concentration. GSTP1and DMNT1proteins have been identified as differential proteins in Oleuropein treated samples. Where comparing to controls, DMNT1 had been downregulated. On the other hand GSTP1 had been upregulated in 625 ppm Oleuropein treated samples. Conclusion Oleuropein may be effective for inhibition of prostate cancer cells in LNcap cell line, by affecting protein expression, antioxidant genes expression, some transcriptional factors expression in relation with cells leading toward apoptosis direction, and metastasis activity reduction.