شناسايي سويه هاي دهاني گونه هاي لاكتوباسيلوس در افراد مبتلا به پريودنتيت مزمن و افراد سالم

Identification of Oral Strains of Lactobacillus species in Patients with Chronic Periodontitis and Healthy Individuals

پريودنتيت مزمن يكي از بيماري هاي عفوني دهاني متداول بزرگسالان است كه باعث التهاب و تخريب بافت پريودنتال و از دست رفتن استخوان و اتصالات آن مي شود. امروزه باافزايش مقاومت هاي ميكروبي ، باكتري درماني روشي جايگزين جهت پيش گيري از بيماري هاي التهابي دهان است كه با تنظيم ميكروبيوتاي دهان و حذف باكتري پاتوژن به حفظ سلامت دهان و دندان كمك مي كند. هدف از اين مطالعه شناسايي سويه هاي لاكتوباسيلوس دهاني درافراد مبتلا به پريودنتيت و سالم ، معرفي سويه هاي غالب در دوگروه است. مواد و روش ها كاربرد محيط كشت اختصاصي و روش مولكولي RFLP-PCR 16srDNA با استفاده از پرايمرهاي يونيورسال براي شناسايي سويه هاي دهاني لاكتوباسيلوس جداشده از نمونه هاي حفره دهان (بزاق، پلاك زبان و لثه) از 59 بيمار مبتلابه پريودنتيت مزمن و 59 فرد سالم .انجام توالي يابي دوطرفه از الگوهاي برش منتخب. يافته ها از 354 ايزوله مورد بررسي بر اساس نتايج كشت و PCR،254 ايزوله لاكتوباسيلوس مثبت بودند. بر اساس نتايج توالي يابي و تجزيه وتحليل داده هاي حاصل از الگوهاي برش آنزيمي جامعه لاكتوباسيلوس هاي جداشده دهاني به 10 گونه مختلف گروه بندي شد. لاكتوباسيلوس پاراكازئي، فرمنتوم گونه غالب در افراد پريودنتيت ولاكتوباسيلوس كازئي، پلانتاروم گونه غالب در افراد كنترل بودند. نتيجه گيري فراواني نسبي لاكتوباسيلوس ها در افراد پريودنتيت مزمن با مقايسه گروه كنترل به ويژه در نمونه هاي پلاك زير لثه كاهش معني داري داشت. فراواني نسبي لاكتوباسيلوس هاي جداشده در نمونه هاي بيماران، 8٪ كمتر از افراد كنترل است. امروزه شواهد زيادي مبني بر استفاده از سويه هاي لاكتوباسيلوس ها در پيش گيري از پريودنتيت مزمن و ايجاد تعادل فلور نرمال حفره دهان وجود دارد. پيش بيني مي شود كه سويه هاي برتر براي اهداف باكتري درماني و استفاده در صنعت دارويي به كار روند.

Chronic periodontitis has been defined as an infectious disease resulting in inflammation within the dental supporting tissue, progressive attachment loss and bone resorption. Nowadays, with increasing microbial resistance, bacterial therapy is an alternative to prevent inflammatory diseases of the oral cavity, which regulates oral microbiota and eliminating pathogenic bacteria. The aim of this study was to identify oral Lactobacillus species and in patients with periodontitis and healthy individuals. Materials & Methods: Use of specific culture medium and restriction fragment-length polymorphism (RFLP) analysis was applied to characterize oral lactobacillus in oral cavity samples (saliva, tongue, gingival plaque) from 59 healthy subjects and 59 patients with chronic periodontitis. The 16srDNA genes of lactobacillus .spp in samples were amplified by PCR with universal primers. Sequencing performed to confirm the species. Results: Out Of 354 examined isolates, 254 isolates were positive for Lactobacillus based on culture and PCR results. From obtained strain cutting patterns analysis of the oral lactobacillus community, were aggregated into ten different species. L.paracasei, L.fermentumin patient and L.casei, L.plantarum were the most predominant species in control groups. Conclusion: The frequency of Lactobacillus in patients with periodontitis was significantly reduced comparing to the control group, especially in gingival plaque samples. The difference in the frequency of isolated lactobacillus in the total sample of patients was 8% less than control subjects. There is increasing evidence that the use of existing lactobacillus strains can prevent chronic periodontitis. These probiotic candidates can be selected for the purpose of bacteriotherapy, dairy manufacture and pharmaceutical use.