اثر عصاره هيدروالكلي گياه كانابيس بر بقاء سلولي و تمايز سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي مشتق از بافت چربي انسان به سلول‌هاي شبه استئوبلاستي

Effect of hydroalcoholic extract of Cannabis sativa on cell survival and differentiation of mesenchymal stem cells derived from human adipose tissue to osteoblast-like cells

زمينه و هدف: ترشحات رزيني گياه كانابيس، حشيش نام دارد و داراي خواص دارويي و روانگرداني فراوان است. مهم‌ترين تركيب روانگردان اين گياه THC (دلتا-9- تتراهيدروكانابينول) است كه قادر به تحريك گيرنده‌هاي كانابينوئيدي در بدن است. اين مطالعه به منظور تعيين اثر عصاره هيدروالكلي گياه كانابيس بر بقاء سلولي و تمايز سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي مشتق از بافت چربي انسان به سلول‌هاي شبه‌استئوبلاستي انجام شد. روش بررسي: در اين مطالعه تجربي سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي به‌دست آمده از بافت چربي ناحيه شكمي انسان با غلظت 100ng/ml از عصاره هيدروالكلي گياه كانابيس تيمار شدند. تاييد هويت سلول‌ها با استفاده از تكنيك‌هاي فلوسايتومتري و RT-PCR انجام شد. اثر سيتوتوكسيك عصاره كانابيس به روش MTT و قابليت تمايز استئوبلاستي سلول‌ها با كمك رنگ‌آميزي آليزارين‌رد بررسي شد. به‌كمك تهيه گسترش متافازي كروموزوم سلولي، آناليز كاريوتيپ انجام گرديد. يافته‌ها: هويت سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي چربي با بيان ماركرهاي مزانشيمي غيرهماتوپويتيك (CD90، CD44 و CD73) و عدم بيان ماركر هماتوپويتيك (CD34 و CD45) تاييد شد. رنگ‌آميزي آليزارين‌رد نشان داد كه تيمار با كانابيس اثري بر تمايز استئوبلاستي اين سلول‌ها ندارد و سلول‌هاي تيمار شده مانند سلول‌هاي گروه كنترل به سلول‌هاي استخواني تمايز يافتند. همچنين عصاره كانابيس اثري بر ساختار، وضعيت مورفولوژيكي و تعداد كروموزوم‌هاي اين سلول‌ها نداشت. نتيجه‌گيري: سلول‌هاي مزانشيمي چربي انسان در حضور عصاره هيدروالكلي گياه كانابيس قابليت تمايز استئوبلاستي خود را حفظ مي‌نمايند. همچنين اين عصاره اثري بر كاريوتيپ كروموزومي سلول‌ها ندارد.

Background and Objective: The resin secretions of Cannabis sativa are called Hashish, which has medicinal and psychological properties. The most important psychoactive compound of this plant is THC (Delta-9-Tetrahydrocannabinol), which can stimulate cannabinoid receptors in the body. This study was carried out to evaluate the effect of hydroalcoholic extract of Cannabis sativa on cell survival and osteoblastic differentiation of human mesenchymal stem cells. Methods: In this experimental study, mesenchymal stem cells derived from fat tissue of human abdominal were treated with 100 ng/ml concentration of hydroalcoholic extract of Cannabis sativa. Flow cytometry and RT-PCR techniques were used for detection of cells. The cytotoxic effect of Cannabis sativa extract and osteoblastic differentiation of cells were investigated using MTT method and Alizarin-Red staining, respectively. The karyotype analysis was performed with the preparation of extended metaphase chromosomes. Results: The identity of the fat mesenchymal stem cells was confirmed by the expression of non-hematopoietic mesenchymal markers (CD90, CD44 and CD73) and the lack of expression of the hematopoietic marker (CD34 and CD45). The Alizarin-Red showed that the treatment with Cannabis sativa has no effect on the osteoblastic differentiation of human fat mesenchymal stem cells, and the treated cells were differentiated into bone cells same as control group. Also, Cannabis sativa extract has no effect on the structure, morphological status and number of chromosomes of these cells. Conclusion: This study showed that human fat mesenchymal cells in the presence of a hydroalcoholic extract of Cannabis sativa maintain the ability of osteoblastic differentiation. Also, this extract has no effect on the chromosomal karyotype of the cells.