تشخيص مولكولي اتيولوژي باكتريايي بيماري آرتريت روماتوئيد

Molecular Detection of Bacterial Etiology of Rheumatoid Arthritis

سابقه و هدف: علل اتيولوژيك آرتريت روماتوئيد بخوبي شناخته نشده است. هدف از اين مطالعه كاربرد پرايمرهاي عمومي و اختصاصي جهت رديابي وجود باكتري‌ها در خون و مايع مفصل بيماران مبتلا به آرتريت روماتوئيد بود. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه تجربي، روش PCR براي شناسايي طيف وسيعي از باكتري‌ها به طور عمومي و استافيلوكوك آرئوس به صورت اختصاصي طراحي شد. 95 نمونه مايع مفصلي و 100 نمونه خون كه در دماي 80- درجه سانتي‌گراد نگه‌داري شده بودند، بررسي شدند. استخراج ژنوم انجام شد. از پرايمر عمومي براي تكثير ژن 16SrRNA و از پرايمر اختصاصي براي تكثير ژن nuc استافيلوكوكوس اورئوس استفاده شد. سپس محصول پرايمر اختصاصي تعيين توالي شد و نتايج به دست آمده ضمن بررسي‌هاي مقايسه‌اي به صورت توصيفي تجزيه و تحليل شدند. يافته‌ها: نتايج نشان داد، از 95 نمونه مايع مفصل و 100 نمونه خون كه در كشت باكتريولوژيك منفي گزارش شده بودند، به ترتيب 33 مورد (34 درصد) و 36 مورد (36 درصد درصد) وجود ژن عمومي 16Sr RNA رديابي شدند. همچنين، به ترتيب در 21 مورد از نمونه‌هاي مايع مفصل و 1 مورد از نمونه‌هاي خون بيماران سويه‌هاي استافيلوكوكوس اورئوس مشاهده شد. استنتاج: نتايج اين مطالعه حاكي از وجود ژن 16SrRNA باكتري‌هاي مختلف از جمله استافيلوكوكوس آرئوس در مايع مفصل و خون بيماران بود. با استناد به اين نتايج احتمالاً بتوان بخش قابل توجهي از اتيولوژي بيماري آرتريت روماتوئيد را توضيح داد و بر مبناي آن پروتكل درماني را اصلاح نمود.

Background and purpose: Etiology of rheumatoid arthritis is not fully recognized. The purpose of this study was to use universal and specific primers to trace bacteria in the blood and synovial fluid in patients with rheumatoid arthritis. Materials and methods: In this experimental study, a PCR method was developed to identify a wide range of bacteria in general and Staphylococcus aureus in specific. Ninety five synovial fluid and 100 blood samples being stored at -80°C were assayed. Genome extraction was performed. Universal primer pairs were used for amplification of 16SrRNA and a specific primer was used for nuc gene of Staphylococcus aureus. Then, the PCR product of the specific primer was sequenced and data were analyzed. Results: The samples of synovial fluid and blood samples of rheumatoid arthritis patients which were negative in bacteriological culture showed 33 (34%) and 36 (36%) cases to be positive for 16Sr RNA, respectively. Also, 21 cases of synovial fluid and only 1 blood sample were positive for Staphylococcus aureus. Conclusion: The results showed the presence of 16SrRNA gene of different bacteria, including Staphylococcus aureus in blood and synovial fluid of patients. Based on current findings, it is likely to explain a part of the etiology of rheumatoid arthritis, thereby modifying some treatment protocols.