بررسي اثر پانيسيك اسيد روغن هسته انار بربيان ژن متالو پروتئيناز يك و سه در سلولهاي THP-1 تحريك شده با ليپوپلي ساكاريد در مقايسه با تركيبات دارويي استروئيدي وغير استروئيدي

The effect of Punicic Acid (pomegranate seed oil) on metalloproteinase genes (MMP-1, 3) in THP-1 cells stimulated with LPS compared with steroidal and non-steroidal drugs.

مقدمه: استئوآرتريت شايع ترين بيماري مفصلي فاقد درمان دارويي كامل است. مهم ترين عامل ناتواني در سالمندان و شايع ترين بيماري دژنراتيو مفصلي در كشورهاي در حال توسعه مي باشد. اصلي ترين تظاهر آسيب شناسي آن درسطح بافتي، تخريب موضعي غضروف مفصلي است. آنزيم هاي ماتريكس متالو پروتئيناز (MMPS) خانواده بزرگ آنزيم هاي پروتئولايتيك وابسته به روي مي باشند كه در پيشرفت وگسترش بيماري هاي التهابي مثل استئوآرتريت شناخته شده است. مواد وروش ها: در اين مطالعه تجربي ، پانيسيك اسيد روغن هسته انار از شركت كارلاوان كرمان خريداري شد. سلولهاي THP-1 از انستيتو پاستور تهيه وكشت داده شد و با غلظت هاي (8 تا100 ميكروگرم بر ميلي ليتر) و در فاصله زماني (24،48،72ساعت)، سميت سلولي پانيسيك اسيد بر عليه سلولهاي THP-1 تحريك شده با LPS، با استفاده از MTT( با طول موج 540) بررسي و جهت سنجش ميزان اثر مهار كنندگي PA بر فعاليت ماتريكس متالو پروتئينازها، الايزا، وسترن بلات،مهاجرت سلولي و تهاجم انجام شد. داده ها با استفاده از آزمون هاي آماري T.student وANOVA تجزيه شد. يافته ها : نتايج الايزا و وسترن بلات اثر مهاركنندگي پانيسيك اسيد را بر روي بيان MMP-1 نشان داد. ولي بر ميزان بيان MMP-3 تاثيري نداشت. همچنين بر اساس آزمون MTT ميزان LC50 معادل 50 ميكروگرم بر ميلي ليتر گزارش شد. نتيجه گيري: با توجه به تاثير پانيسيك اسيد بر ميزان بيان برخي MMPSو اثركم آن بر MMP-1، اين ماده مي تواند به عنوان يك كانديد بالقوه مطالعات بيشتر بر روي ساير MMP ها و جايگزيني داروهاي شيميايي معرفي گردد.

Introduction: Osteoarthritis is a common joint disease for which there are currently no disease-modifying drugs available. Osteoarthritis (OA) affects most of the elderly population, the main features of which are cartilage damage. Degradation of the cartilage extracellular matrix is a central feature of the disease and is widely thought to be mediated by proteinases that degrade structural components of the matrix. The matrix metalloproteinases (MMPs) are a family of human zinc endopeptidases that play significant roles in inflammatory diseases such as osteoarthritis. Materials and methods: In this experiential laboratory study. punicic acid of pomegranate seed oil was purchased from Clarodan Kerman Co,. THP-1 cells (Pasteur Institute of Iran) were cultured and administered with concentration of 8 to 100 μg/ml (in 24h, 48h, and 72h). Cellular toxicity of punicic acid against THP-1 was estimated using the MTT assay and to measure the inhibitory effects of PA on Matrix metalloproteinase proteinase activity, ELISA and Western blot, migration and invasion tests were performed. Data were analyzed using T.student and ANOVA. Results: Western blotting and ELISA showed inhibitory effect of punicic acid on the expression of MMP-1 but not in MMP-3. Punicic acid of pomegranate seed oil shows the most cellular toxicity effect at lc50=50 micrograms per milliliters and 72 hours after treatment. Conclusion: According to effect of Punicic Acid on MMP-1 expression, this material can be used as a potential candidate for further studies on the other MMPS and its replacing the chemical drugs.