جداسازي، شناسايي مولكولي و بهينه سازي توليد آنزيم آميلاز در اكتينوميست دريايي (Acx1) از خور شادگان

Isolation, molecular identification and optimization of amylase production of marine actinomycete (Acx1) from Shadegan estuary

اكتينوميست هاباكتري هاي گرم مثبت و منابعي سرشاراز تركيبات زيستي فعال مي باشند كه متابوليت هاي ثانويه حاصله از آنها به طور گسترده به عنوان تركيبات دارويي استفاده شده است. يكي از مهمترين متابوليتهاي ثانويه آنزيم ها مي باشند كه بعنوان بيوكاتاليست در پروسه هاي بيولوژيكي عمل مي°كنند. اين تركيبات به لحاظ اقتصادي مقرون به صرفه و سازگار با محيط زيست مي باشند. استحصال انواع آنزيمها ازاكتينوميست ها كمك شاياني به صنعت و اقتصادجهاني كرده است به طوري كه يكي از شاخص هاي رونق اقتصادي در كشور هاي پيشرفته بهره مندي از اين آنزيم هاست .هدف از اين تحقيق جداسازي و شناسايي اكتينوميست از رسوبات خور شادگان و بررسي شرايط بهينه رشدوتوليد آنزيم آميلاز در جدايه منتخب مي باشد.شناسائي مولكولي جدايه توسط تكثير ژن 16S rRNA بااستفاده از پرايمرهاي 27 F و1492R طي فرايند PCR انجام شد. شرايط بهينه رشد جدايهAcx1 در شرايط نمك 6% و8pHو نيز دماي ℃35 پايش شدو مقدار آنزيم بدست آمده در شرايط بهينه 80150 واحد (يك واحد فعاليت آميلازي مقدار آنزيم مورد نياز براي آزادسازي يك ميكرو مول گلوگز در يك دقيقه است ) بود. نتيجه حاصل نشان داد كه توليد آنزيم با آهنگ رشد باكتري رابطه مستقيم دارد.

Actinomycetes, Gram positive bacteria, are rich sources of bioactive compounds. Secondary metabolites of these bacteria are used as pharmaceutical compounds Enzymes are one of the most important secondary metabolites which act as bio-catalysts to perform reactions in bio-processes in an economical and environmentally-friendly manner. Enzyme production from actinomycetes makes significant facility in industrial and world economic. So, that it is becoming one of the economic indexes of developed countries. The goal of this research is isolation of actinomycetes from Shadegan estuary, optimization of bacterial growth and amylase production. Molecular identification was done by amplification of 16S rRNA gene using R1492 and F27 primers. Optimum growth condition was found at 6% NaCl concentration, 35˚C temperature and pH 8 . Maximum amylase activity in optimum condition was 80150 Unit (one Unit is amount of enzyme that release one microgram of glucose in a minute). The results showed that enzyme production is related to growth of bacteria conditions.