باززايي درون شيشه‌اي گياه سپستان (Cordia myxa L ) به روش اندام‌زايي مستقيم‌

In vitro plant regeneration through direct organogenesis in Cordia myxa L.

در اين پژوهش، دستورالعمل سريع و كارآمد باززايي درون شيشه اي گياهك هاي سپستان با استفاده از ريزنمونه هاي مختلف بررسي شد. در اين پژوهش از آزمايشي جداگانه براي بهينه سازي شاخه زايي، يك آزمايش براي پرآوري و يك آزمايش ريشه زايي استفاده شد. طرح آماري مورد استفاده در آزمايش شاخه زايي، فاكتوريل 7×3 در قالب طرح پايه كاملاً تصادفي با سه تكرار و طرح آماري مورد استفاده در آزمايش هاي پرآوري و ريشه زايي طرح پايه كاملاً تصادفي بود. نتايج نشان داد بيشترين شاخه زايي (33/4 شاخه از هر ريزنمونه) از ريزنمونه هاي لپه مستقر در محيط كشت MS حاوي 4 ميلي-گرم در ليتر كينتين (KIN) به همراه 01/0 ميلي گرم در ليتر نفتالين استيك اسيد (NAA) به دست آمد. مدت زمان لازم براي آغاز شاخه زايي در حدود 21-15 روز به طول انجاميد. براي پرآوري شاخه هاي توليدي، ريزنمونه ها در محيط كشت MS حاوي غلظت هاي متفاوت دو نوع سيتوكنين (KIN يا BAP) به همراه 01/0 ميلي گرم در ليتر NAA قرار گرفتند. بيشترين پرآوري شاخه در تيمار مشابه با شاخه زايي، در محيط كشت MS حاوي 4 ميلي گرم در ليتر KIN به همراه 01/0 ميلي گرم در ليتر NAA، به دست آمد. همچنين نتايج نشان داد كه ايندول بوتريك اسيد (IBA) با غلظت 1 ميلي گرم در ليتر مؤثرترين تيمار براي ريشه زايي بود. گياهك هاي ريشه دار شده با موفقيت توانستند مراحل سازگاري در شرايط گلخانه اي را سپري كنند.

In this study, a rapid and efficient protocol was developed for in vitro plantlet regeneration of Lasora (Cordia myxa L.) using different explants. Seperate experiments, one for shoot regeneration optimization, one for proliferation, and one for induction were conducted in this study. Factorial design 3*7 based on compeletly randomized design was used for shoot regeneration but just compeletly randomized design used for proliferation and induction. The highest frequency of shoot regeneration (4.33) from cotyledon was obtained on MS medium supplemented with 4.0 mg/l kinetin (KIN) and 0.01 mg/l 1-Naphthaleneacetic acid (NAA). The explants started regenerating shoots after 15-21 days in culture. To proliferation the regenerated shoot, the explants were transferred to MS medium containing different concentrations of KIN or BAP with 0.01 mg/l NAA. Shoot multiplication and elongation took place on the same medium. Indole-3-butyric acid (IBA) at 1.0 mg/l was most effective for root regeneration. Using the current protocol, it tooks 2 months to regenerate plantlets. The in vitro regenerated plantlets were successfully acclimatized and established in greenhouse conditions.