شناسايي فعاليت و بيان ژن پمپ افلاكس سويه هاي مقاوم به سيپروفلوكساسين استافيلوكوكوس اورئوس

سابقه و هدف: باكتري استافيلوكوكوس اورئوس يكي از مهمترين عوامل عفونت‌زاي بيمارستاني مي‌باشد. اخيرا سويه‌هاي استافيلوكوكوس اورئوس نسبت به آنتي بيوتيك سيپروفلوكساسين مقاوم شده‌اند و پمپ افلاكس در اين مقاومت نقش مهمي را ايفا مي‌كند. هدف از اين مطالعه، بررسي وجود ژن هاي پمپ افلاكس (norA و norB)، بيان و فعايت آن در سويه‌هاي مقاوم به سيپروفلوكساسين استافيلوكوكوس اورئوس بود . مواد و روش ها: در اين مطالعه، تعداد 250 نمونه باليني به منظور جداسازي سويه هاي استافيلوكوكوس اورئوس، بررسي مقاومت آنتي بيوتيكي، وجود و بيان ژن‌هاي پمپ افلاكس norA و norB در آنها به ترتيب توسط روش هاي PCR و real-time PCR مورد مطالعه قرار گرفت. در انتها، پمپ افلاكس فعال در سويه‌هاي مقاوم به سيپروفلوكساسين استافيلوكوكوس اورئوس توسط روش اتيديوم برومايد بررسي شد. يافته ها: از مجموع نمونه هاي مورد برررسي، 50 سويه استافيلوكوكوس اورئوس جداسازي شد كه از اين ميان 12 جدايه (24%) مقاوم به سيپروفلوكساسين بودند. ميزان شيوع ژن هاي norA و norB در سويه‌هاي مقاوم به سيپروفلوكساسين به ترتيب 100% و 83% بود. همچنين تمامي سويه‌هاي مقاوم به سيپروفلوكساسين داراي پمپ افلاكس فعال بودند. نتايج real-time PCR نشان داد كه اختلاف معني داري در ميزان بيان پمپ ‌هاي افلاكس در سويه‌هاي مقاوم به سيپروفلوكساسين وجود دارد. نتيجه گيري: نتايج اين مطالعه نشان داد كه پمپ‌هاي افلاكس norA و norB نقش مهمي در ايجاد مقاومت به سيپروفلوكساسين ايفا مي‌كند.

Background & Objectives: Staphylococcus aureus is one of the important nosocomial infection agents. Recently, S. aureus strains have become resistant to ciprofloxacin and the efflux pump is considered as its contributor. Herein, we investigated the presence, expression, and activity of efflux pump genes (norA and norB) among ciprofloxacin-resistant S. aureus isolates. Materials & Methods: A total of 250 clinical samples were subjected to isolation of S. aureus strains. The antibiotic resistance pattern was characterized and the presence and expression level of norA and norB genes was assessed using PCR test and real-time PCR test, respectively. Finally, active efflux pumps were detected in ciprofloxacin-resistant S. aureus strains using the ethidium bromide test. Results: Among total clinical samples, 50 S. aureus strains were recovered. Of this 12 samples (24%) were resistant to ciprofloxacin. Moreover, norA and norB genes were found in 100 % and 83% of ciprofloxacin-resistant isolates, respectively. All ciprofloxacin-resistant isolates exhibited active efflux pumps. Real-time PCR results revealed that the isolates are more resistant to ciprofloxacin having a high level of efflux pump gene expression. Conclusion: The results of this study showed that norA and norB efflux pump genes play an important role in resistance to ciprofloxacin in S. aureus strains.