عنوان مقاله :
انتقال ژن cry1a105 به گوجه‌فرنگي به‌منظور افزايش مقاومت به آفت Heliothis sp
پديد آورندگان :
توحيدفر، مسعود دانشگاه شهيد بهشتي تهران - دانشكده علوم و فناوري زيستي - گروه بيوتكنولوژي گياهي , گلزاري، رسول دانشگاه شهيد بهشتي تهران - دانشكده علوم و فناوري زيستي - گروه بيوتكنولوژي گياهي , ملكي زنجاني، بهرام دانشگاه شهيد بهشتي تهران - دانشكده علوم و فناوري زيستي - گروه بيوتكنولوژي گياهي
كليدواژه :
ناقل pBI121 , سويه LBA4404، , اگروباكتريوم، , cry1a105، , گوجه‌فرنگي،
چكيده فارسي :
گوجه‌فرنگي (Solanum lycopersicum) يكي از مهم‌ترين سبزي‌ها در جهان است كه طيف وسيعي از پاتوژن ها و آفات گياهي به اين گياه حمله مي‌كنند. يكي از مهم‌ترين اين آفات، لارو هليوتيس است كه عمدتاً به ميوه و برگ خسارت زده و باعث كاهش محصول مي‌شود. ﺩﺭ ﺍﻳﻦ ﭘﮋﻭﻫﺶ ﺗﺮﻛﻴﺐ ﺳﺎﺯﻩ ژﻧﻲ cry1a105 تحت راهانداز دائمي CaMV 35S و خاتمه دهنده NOS ﺩﺭ ناقل pBI121 همسانه سازي ﺷﺪﻩ ﻭ ﺑﻪ ﺍﮔﺮﻭﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮﻡ تومفاسينس ﺳﻮﻳﻪ LBA4404 منتقل و سپس ﺑﻪ ﮔﻴﺎﻩ گوجه‌فرنگي انتقال داده شد. ريز نمونه‌هاي برگ لپه‌اي ﺍﺯ ﮔﻴﺎﻩ گوجه‌فرنگي ﺑﺮﺍﻱ ﺗﺮﺍﺭﻳﺰﺵ مورد استفاده ﻗﺮﺍﺭ ﮔﺮﻓﺘﻨﺪ. ﮔﻴﺎﻫﺎﻥ ﺗﺮﺍﺭﻳﺨﺘﻪ احتمالي ﺑﺮ ﺭﻭﻱ ﻣﺤﻴﻂ MS ﻫﻤﺮﺍﻩ ﺑا ﻭﻳﺘﺎﻣﻴﻦ B5 ﺣﺎﻭﻱ 3/0 ميلي‌گرم در ليتر NAA و 5/1 ميلي‌گرم ﺩﺭ ﻟﻴﺘﺮ BAP و نيز 50 ميلي‌گرم ﺩﺭ ﻟﻴﺘﺮ ﺁﻧﺘﻲﺑﻴﻮﺗﻴﻚ ﻛﺎﻧﺎﻣﺎﻳﺴﻴﻦ ﺍﻧﺘﺨﺎﺏ ﺷﺪﻧﺪ. ﺗﺠﺰﻳﻪ ﻣﻮﻟﻜﻮﻟﻲ ﮔﻴﺎﻫﺎﻥ ﺗﺮﺍﺭﻳﺨﺘﻪ (T0) ﺑﺎ ﺍﺳﺘﻔﺎﺩﻩ ﺍﺯ PCR ﻭﺟﻮد ژن cry1a105 ﺭﺍ ﺩﺭ ﮔﻴﺎﻫﺎﻥ ﺗﺮﺍﺭﻳﺨﺘﻪ تائيد ﻛﺮﺩ. از گياهاني كه PCR مثبت نشان دادند بذرگيري به عمل آمد، گياهان مورد نظر تا نسل T2 كشت شدند و در اين نسل وجود ژن انتقال يافته در آن‌ها با آناليز مولكولي (RT-PCR) مورد بررسي قرار گرفت. گياهاني كه وجود ژن موردنظر در آن‌ها تائيد شده بود با آزمون زيستي مورد بررسي قرار گرفتند. آزمون زيست‌سنجي مقاومت رقم گوجه‌فرنگي كارون را (70%) به آفت لارو هليوتيس در مقايسه با شاهد نشان داد.
عنوان نشريه :
مهندسي ژنتيك و ايمني زيستي
