ارزيابي توان تشكيل هسته يخ باكتري‌هاي جداسازي شده از ژنوتيپ‌هاي تجاري نيشكر

Evaluation of ice nucleation ability of bacteria isolated from commercial sugarcane genotypes

استان خوزستان تنها استان نيشكر خيز ايران محسوب مي­ شود و سرمازدگي در بعضي از سال­ ها خسارت زيادي به اين محصول ارزشمند وارد مي­ كند. از آن­جايي‌ كه تاكنون پژوهش جامعي در زمينه‌ي شناسايي باكتري­ هايي با پتانسيل تشكيل هسته­ ي يخ در سرمازدگي انجام‌ نشده است اين پژوهش با اين هدف انجام شد. در اين بررسي، از استرين­ هاي اندوفيت و اپي­فيت جداشده از گياه نيشكر واقع در مؤسسه تحقيقات و آموزش نيشكر و صنايع جانبي استفاده شد. ژن مولد هسته­ ي يخ توسط جفت آغازگرهاي 3076f/3463r و 3308f/3463r رديابي شد. براي بررسي پتانسيل يخ­زدگي استرين­ هاي نماينده، چهار آزمون "تعيين فعاليت هسته­ ي يخ به روش انجماد درون لوله"، "آزمون انجماد قطره در دماي منفي بيست درجه سانتي­ گراد"، "آزمون هسته­ ي يخ روي برگ­ هاي بريده شده در شرايط آزمايشگاه" و "آزمون هسته ي يخ روي گياه نيشكر در شرايط گلخانه" انجام شد. در پايان گونه ­هاي Burkholderia gladioli،Burkholderia fungorum، Burkholderia cantaminans،Mesorhizobium huakuii،Ochrabacterium ciceri،Microbacterium proteolyticum، Microbacterium foliorum، Ralstonia solanacearum، Ralstonia picketiiوXanthomonas compestris با شدت­­ هاي مختلف علائم سرمازدگي را در آزمون ­هاي مذكور نشان دادند. براي هيچ­كدام از استرين­ هاي گونه‌هاي مذكور، به­ غير از استرين‌هاي گونه X. campestris در منابع و پژوهش­ هاي پيشين، فعاليت هسته­ ي يخ گزارش نشده است. آزمون‌هاي بررسي فعاليت هسته ­ي يخ استرين‌هاي انجام‌شده در آزمايشگاه و گلخانه نيز تأييدكننده نتايج حاصل از آزمون مولكولي بودند. علاوه بر آن، براساس اين آزمون­ ها مشخص شد كه رقم CP69-1062 حساس­ترين و رقم CP73-21 مقاوم­ترين رقم نسبت به مشكل سرمازدگي است. اين نتايج اطلاعات خوبي براي توليدكنندگان و تشويق آن­ها به استفاده از ارقام مقاوم فراهم مي­ آ­ورد.

Background and Objectives Khuzestan is the only province with sugarcane cultivation. One of the limiting factors in the production of this crop is the occurrence of frost damages in some years. Since no comprehensive research has yet been conducted on detection and evaluation of bacteria with the potential to form nuclear ice in frostbite, this study was carried out to evaluate this subject. Materials and Methods This study was carried out in the laboratory of Institute for Research and Training of Sugar and Auxiliary Industries. Endophytic and epiphytic strains of bacteria were isolated from sugarcane. To test the freezing potential of representative strains, four tests including, "determination of Ice nucleation activity by freezing in the tube", "freezing droplet test at -20 °C", "Ice nucleation test on sugarcane cut leaves in vitro" and "Ice nucleation test on sugarcane plant in greenhouse conditions" were performed. Also the genes of the nucleus were detected by 3076f / 3463r and 3308f / 3463r specific primers. Results Results show that bacteria species B. gladioli, B. fungorum, B. cantaminans, M. huakuii, O. ciceri, M. proteolyticum, M. Foliorum, R. solanacearum , R. picketii and X. campestris had different degrees of symptoms. In addition, the genes of the nucleus were detected by 3076f / 3463r and 3308f / 3463r specific primers. For all of above mentioned bacterial strains, specifically strain X. campestris, no references have been reported of ice nucleation activity. To assess susceptibility or resistance of sugarcane, cultivar CP69-1062 were the most susceptible and highly damaged in the tests including "Ice nucleation test on sugarcane cut leaves in vitro" and "Ice nucleation test on sugarcane plant in greenhouse conditions". In addition, CP57-614 and CP48-103 cultivars showed minimum variation in frosting in compression to CP69-1062 cultivar. Two cultivars including CP73-21 and SP70-1143 exhibited a high degree of resistance to frostbite. Discussion Due to the high variation among Ice-Nucleating bacteria and the sensitivity of commercial cultivars, our finding can be a suitable option for producers and encourage them to use resistant cultivars in the field.