تاثير ديواره سلولي و عصاره سيتوپلاسمي باكتري لاكتوباسيلوس روتري بر تحريك توليد سايتوكاين هاي اينترلوكين-4 و اينترفرون گاما

Effect of Lactobacillus reuteri cell wall and cytoplasmic extract on stimulating of IL-4 and IFN γ cytokines production

مقدمه: لاكتوباسيلو‌س ها به عنوان ميكروارگانيسم‌هاي زنده‌اي شناخته شده‌اند كه در معده، ترشحات صفراوي و پانكراس وجود دارند. به سلول‌هاي اپيتليال متصل مي‌شوند و در روده انسان كلونيزه مي‌گردند. بسياري از پروبيوتيك‌ها به گروه بزرگي از باكتري‌ها به نام باكتري‌هاي اسيد لاكتيك تعلق دارند. با توجه به خواص تنظيم كنندگي سيستم ايمني پروبيوتيكها و اثر تنظيمي آنها بر عملكردهاي سيستم ايمني هدف اين مطالعه ارزيابي اثر ديواره سلولي و عصاره سيتوپلاسمي باكتري لاكتوباسيلوس روتري بر تحريك توليد سايتوكاين هاي اينترلوكين-4 و اينترفرون گاما مي باشد. مواد و روشها: به اين منظور20 نمونه محصولات لبني سنتي و پاستوريزه جمع‌آوري شد. شناسايي مولكولي با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي انجام شد. DNA باكتري‌ها جداسازي و شناسايي گونه‌هاي باكتري‌ها با تعيين توالي ژنتيكي محصول PCR صورت گرفت. سپس خون هپارينه انساني تهيه و سلول‌هايي تك هسته‌اي خون محيطي جداسازي شد. ميزان تحريك سيستم ايمني، سايتوكاين‌هاي اينترلوكين-4 و اينترفرون گاما با روش الايزا اندازه‌گيري شدند. نتايج: از 20 نمونه محصولات لبني، 7 ايزوله لاكتوباسيلوس روتري جداسازي و شناسايي شد. سيستم ايمني در جهت توليد اينترلوكين-4 و اينترفرون گاما در حضور ديواره سلولي و عصاره سلولي سيتوپلاسمي باكتري لاكتوباسيلوس روتري تحريك نشد. بحث و نتيجه گيري: سطح سايتوكاين‌هاي توليد شده در سلول‌هاي مونوكلئار انساني بعد از تحريك سيستم ايمني افزايش پيدا نكرد. باكتري لاكتوباسيلوس روتري در ايمونوتراپي كاربرد نخواهد داشت.

Introduction: Lactobacillus bacteria are known as living microorganisms in the stomach, biliary secretions and pancreas. They attach to the epithelial cells and colonize the human intestines. Many probiotics belong to a large group of bacteria called lactic acid bacteria. In according to immunomodulatory effect of probiotics and effect of these bacteria on the effectiveness of immune responses, we proposed the evaluation of Lactobacillus reuteri cell wall and cytoplasmic extract effects on stimulating of IL-4 and IFN γ cytokines production. Material and Methods: For this purpose 20 samples of traditional dairy and pasteurized dairy products were collected. Molecular identification was performed using molecular-specific primers. Bacterial DNA was extracted and identification of bacterial species was determined by genetic sequencing of PCR product. Human heparin blood was then prepared and peripheral blood mononuclear cells were isolated. To evaluate immune stimulation, IL-4 and IFN γ cytokines produced by ELISA were measured. Results: The results of this study showed that from 20 dairy samples, 7 isolates of Lactobacillus reuteri was identified. The immune system for the production of interleukin-4 and IFN γ in the presence of cell wall and cytoplasmic cell extracts of Lactobacillus reuteri was not stimulated. Lactobacillus casei extract compared to other two bacteria has the greatest effect on immune stimulation and increased IL-4 production. Discussion and conclusion: The level of cytokines produced in human monocular cells did not increase after stimulating the immune system. The Lactobacillus reuteri Bacterium will not be used in immunotherapy.