عنوان مقاله :
بيان، تخليص و پايداري آنزيم اوريكاز در باكتري اشريشيا كلي
عنوان به زبان ديگر :
Expression, Purification, and Stability Study of Uricase in Escherichia coli
پديد آورندگان :
دانشجو، سميه دانشگاه علوم پزشكي تهران - دانشكده فناوري‌هاي نوين پزشكي - گروه نانوفناوري پزشكي , دشتبان‌مقدم، الهه سادات دانشگاه تربيت مدرس - دانشكده علوم زيستي - گروه بيوشيمي , جعفري، محمودرضا دانشگاه علوم پزشكي مشهد - دانشكده داروسازي - مركز تحقيقات نانوفناوري , رضايت‌سرخ‌آبادي، مهدي دانشگاه علوم پزشكي تهران - دانشكده فناوري‌هاي نوين پزشكي - گروه نانوفناوري پزشكي , خواجه، خسرو دانشگاه تربيت مدرس - دانشكده علوم زيستي - گروه بيوشيمي
كليدواژه :
پايداري حرارتي , اسيداوريك , نقرس , Rasburicase , اوريكاز
چكيده فارسي :
به‌دنبال غلظت بالاي اوريك‌اسيد، بيماري‌هايي مانند نقرس (التهاب مفاصل)، شكل‌گيري سنگ‌هاي كليوي، سندرم ليش- نيهان، بيماري‌هاي قلبي، ديابت تيپ 2 و سندرم‌هاي متابوليك ايجاد مي‌شود. از جمله داروهايي كه موجب كاهش سطح آن در پلاسما مي‌شود آنزيم اوريكاز است. توليد، فرمولاسيون و نگهداري پروتئين‌ها نياز به توجه خاصي دارد تا ساختار آن تغيير نكند و بيشترين ميزان فعاليت و پاسخ و كمترين ميزان حساسيتزايي به دست آيد، در اين مطالعه، آنزيم اوريكاز پس از كلون، ترانسفورم، بيان در باكتري اشريشيا كلي و تخليص توسط كروماتوگرافي تمايلي،در مقايسه با نمونه رايج دارويي آنزيم Rasburicase فعاليت بالاتري داشته و نيز در همه دماهاي مورد مطالعه پايداري حرارتي (50، 37، 25، 4 و C°20-)،آنزيم اوريكاز نوتركيب داراي مقاومت بيشتري نسبت به آنزيم رايج دارويي است. حال با توجه به نتايج به‌دست‌آمده و همچنين اهميت بالاي آنزيم اوريكاز در پيشگيري، درمان و قيمت بالاي اين داروي وارداتي، توسعه اشكال پايدار اين آنزيم ميتواند به‌عنوان مصارف دارويي مد نظر قرار گيرد.
چكيده لاتين :
Some diseases such as gout, the formation of kidney stones, Lesch-Nyhan syndrome, Heart disease, diabetes type II and metabolic syndrome are caused due to the high concentration of uric acid. Within drugs, uricase significantly decreases the level of uric acid in plasma. The production, formulation and preservation proteins need special conditions so that there was no alteration in their structure and highest activity and response, at the same time the lowest immunogenicity can be achieved.In this study, uricase from Aspergillus flavus was cloned and expressed in Escherichia coli BL21. The protein was then purified using affinity chromatography. The enzyme activity and stability were compared with the common industrial Rasburicase. Results showed higher activity and stability at different temperatures (50, 37, 25, 4, and-20°C). Since uricase has an important role in the prevention and cure of mentioned diseases, therefore, the stable form of this enzyme could be a potential candidate for drug development.
عنوان نشريه :
زيست فناوري دانشگاه تربيت مدرس
