اثر ذرات نانو هيدروكسي آپاتيت بر انجماد اسپرم قوچ

Effect of nano-hydroxyapatite on freezing ram spermatozoa

اين مطالعه به منظور بررسي اثر حفاظتي ذرات نانو هيدروكسي آپاتيت بر اسپرم طي انجماد با استفاده از پنج راس قوچ انجام شد. انزال ها (30=n) به صورت سه روز يك بار در شش نوبت جمع آوري شد. در هر نوبت، انزال ها تجميع و به 12 قسمت مساوي تقسيم شدند. مقدار 0/01، 0/02، 0/05 يا 0/1 درصد هيدروكسي آپاتيت و 3، 5 يا 7 درصد گليسرول به هر بخش اضافه شد. نمونه ها منجمد شده و براي دو هفته ذخيره شدند. سپس تعداد دو پايوت از هر تكرار (جمعا 144 پايوت)، يخ گشايي شد و به مدت شش ساعت در 37 درجه سلسيوس نگهداري شدند. ميزان تحرك، زنده ماني، سلامت غشاي اسپرم و سلامت آكروزوم طي ساعات صفر، 3 و 6 پس از يخ گشايي مورد ارزيابي قرار گرفت. نتايج نشان داد كه اثر متقابل ذرات نانو هيدروكسي آپاتيت، گليسرول و زمان بر فراسنجه هاي اندازه گيري شده معني دار نبود (0/05P). سلامت غشا در سطح 0/02 ذرات نانو هيدروكسي آپاتيت (52/7%) بيشتر از ساير سطوح بود (0/05>P). بنابراين افزودن 0/02 درصد ذرات نانو هيدروكسي آپاتيت به رقيق كننده مني قوچ سبب بهبود كيفيت اسپرم در روند انجماد مي شود.

This experiment was designed to evaluate the protective effect of nano-hydroxyapatite against freezing damages on spermatozoa using five rams. Ejaculates (N=30) were collected with three-day intervals between sessions for six times. Ejaculates were pooled and split into 12 parts at each session. The amount of 0.01, 0.02, 0.05 or 0.1% nano-hydroxyapatite and 3, 5 or 7% glycerol were added. Samples were frozen and stored for two weeks. After that two straws from each treatment for each replication (totally 144 straws) were thawed and incubated at 37 ° C for 6 h. Sperm motility, viability, membrane integrity and acrosome integrity were evaluated at 0, 3 and 6 h after thawing. Results showed that there was no interaction between nano-hydroxyapatite, glycerol and incubation time (P>0.05). Sperm viability and acrosome integrity were not affected by different levels of nano-hydroxyapatite particles (P>0.05). There was no difference between the level of 0.01 and 0.1% nano-hydroxyapatite particles on the total (21.8 and 21.5%, respectively) and progressive sperm motility (17.8 and 17.7 %, respectively; P>0.05). Total and progressive sperm motility was the highest (24.8 and 21.0%, respectively) in the level of 0.02% nano-hydroxyapatite particles (P<0.05). Membrane integrity was higher in the level of 0.02% nano-hydroxyapatite particles (52.7%) than other levels (P<0.05). Therefore, the addition of 0.02% nano-hydroxyapatite particles to the ram semen extender improved the quality of frozen spermatozoa.