اثر بيمارگر قارچي Leptosphaeria maculans در مرحله زيواپرور بر پروفيل متابوليكي گياه كلزا رقم هايولا 401 در يك برهم كنش سازگار

Effect of fungul pathogen Leptosphaeria maculans at biotrophic stage on canola metabolic profile cultivar Hyola 401 in a compatible interaction

پيشرفت­ هاي اخير در زمينه ابزارها و استخراج داده­ ها، امكان مطالعه تاثير تنش­ هاي مختلف را بر متابوليسم اوليه و ثانويه گياه به ­وجود آورده است. مطالعه مكانيسم­ هاي بيماريزايي و شناسائي مسيرهاي متابوليكي مرتبط با بيماريزائي در گياه، تغييرات در پروفيل متابوليكي بخش قطبي حاصل از برهمكنش سازگار قارچ Leptosphaeria maculans (فرم غيرجنسي Phoma lingam) (جدايه گرگان) و كلزا رقم حساس هايولا 401 به كمك دستگاه كروماتوگرافي گازي-طيف ­سنج جرمي (GC-MS) مورد بررسي قرار گرفت. بدين منظور در شرايط كاملاً كنترل شده، 14 روز پس از كشت، در مرحله دو لپه ­اي، گياهان به ترتيب با سوسپانسيون 107 اسپور در ميلي ­ليتر و آب (شاهد) به روش قطره-زخم مايه ­زني شدند. 48 ساعت پس از مايه ­زني نمونه ­برداري بافت محل مايه ­زني انجام شد و به سرعت تحت شوك سرمايي قرار گرفت. متابوليت‌ها با حلال متانول استخراج و به كمك دستگاه GC-MS شناسايي و اندازه‌گيري شده و مورد تجزيه و تحليل آماري قرار گرفتند. تعداد 70 متابوليت نسبت به شاهد خود تغييرات معني‌داري (P ≤0.05) نشان دادند كه منجر به تغييرات در 28 مسير متابوليكي در سلول‌هاي گياه بود. در اين برهمكنش تعدادي مسير از مسيرهاي متابوليكي دخيل در تقويت ديواره­ي سلولي، توليد تركيبات فنولي، آلكالوئيدي، ترپنوئيدي، توليد انرژي، توليد هورمون و انتقال سيگنال­ تضعيف گرديد. همچنين فراواني تعداد زيادي از قندها كاهش يافت كه اين موضوع نقش حياتي اين كربوهيدرات­ ها را در بيماريزايي P. lingamدر برهم كنش سازگار با يك رقم حساس پيشنهاد مي­ كند.

Recent improvements in instrumentation and data mining have made it possible to investigate the effects of various stressors on primary and secondary metabolisms. In this study, in order to study mechanisms of pathogenesis and identify the pathogenesis-related metabolic pathways, changes in metabolic profiles resulting from a compatible interaction between canola cultivar (Hyola 401) and Leptosphaeria maculans (anamorph Phoma lingam) (Phkv102 isolate) were investigated by GC-MS chromatography using the polar fraction of plant extract. Under completely controlled conditions, 14 days after planting, when cotyledons were completely unfolded, the plants were inoculated by 107 spores per ml suspensions and water (control) by drop-wound method, respectively. The tissue samples were taken 48 hours after inoculation and were shock frozen immediately. Metabolites were extracted using methanol as solvent, identified and quantified with GC-MS and subjected to statistical analyses. Results indicated that 70 metabolites showed significant difference over their controls at P≤0.05, which is caused by changes in 28 metabolic pathways. Infection of canola cultivar Hyola 401 to P. lingam resulted in change in pathways related to the host cell wall, phenolic compounds, alkaloids and terpenoids biosyntesis, energy generator, hormone biosynthesis, signal transduction.The abundance of a number of sugars was also decreased, suggesting the crucial role of these carbohydrates in pathogenesis in an incompatible interaction of P. lingam and a susceptible cultivar.