پديد آورندگان :
ربيعي، سميرا دانشگاه شيراز - دانشكده كشاورزي - مركز تحقيقات ويروس شناسي گياهي , افشاري فر، عليرضا دانشگاه شيراز - دانشكده كشاورزي - مركز تحقيقات ويروس شناسي گياهي - بخش گياهپزشكي , ايزدپناه، كرامت اله دانشگاه شيراز - دانشكده كشاورزي - مركز تحقيقات ويروس شناسي گياهي
چكيده فارسي :
اتوفاژي يك فرايند محافظت شده در يوكاريوت‌ها براي حذف اجزاي سلولي آسيب ديده يا نا خواسته است. اين مسير در مقاومت به بيماريهاي گياهي نيز دخيل مي‌باشد اما مكانيزم آن دقيقا مشخص نيست. در اين مطالعه تاثير دو پروتيين سركوبگر (:Pفسفوپروتيين و :P3پروتيين فرعي 3) متعلق به ويروس موزائيك زرد راه راه جو (BYSMV) بر بيان چهار ژن مهم دخيل در اتوفاژي شامل ATG2، ATG6، ATG7 و AGO1 در گياه N. benthamiana مورد بررسي قرار گرفت. ژن‌هاي P و P3 BYSMV در ناقل pCAMBIA-1302 تحت پروموتور 2×35S و برچسبHemagglutinin در انتهاي آميني به منظور رديابي پروتيين‌‌ها، همسانه‌سازي شدند. سازه هر ژن با استفاده از اگروباكتريوم در سطح پشت برگ گياهان N. benthamiana تزريق گرديد. پنج روز پس از تزريق، ميزان بيان اين ژن‌ها با استفاده از پي‌سي‌آر در زمان واقعي اندازه‌گيري شد. نتايج نشان داد كه هر سه تيمار(P, P3, P+P3) منجر به افزايش بيان ژن‌هاي ATG2، ATG6 و ATG7 گرديدند. اين افزايش بيان در ژن ATG2 به ترتيب 5/57، 6/15 و 5/26 برابر در تيمار‌هايP/GFP ، P3/GFP و P/P3/GFP بود. در حالي كه هر سه تيمار بر بيان ژن AGO1 اثر منفي داشتند بنحوي كه بيان آن را تقريبا 5/1 برابر، نسبت به تيمار كنترل، كاهش دادند. اين نتايج حاكي از نقش ژن‌هاي AGO1، ATG6،ATG7 و ATG2 در پاسخ دفاعي گياه N. benthamiana در مقابل سركوبگر BYSMV مي‌باشد كه مي‌تواند به درك بهتر مكانيز‌م‌هاي دفاعي پيچيده گياه در مقابل بيمارگر‌هاي ويروسي و دست يابي به روش‌هاي جديد كنترل ويروس‌هاي گياهي كمك نمايد.
چكيده لاتين :
Autophagy is a degradation process in eukaryotes through which damaged or unwanted intracellular components are degraded. This process is also involved in plant disease resistance, although its mechanisms are not precisely known. Autophagy is regulated by multiple autophagy-related proteins (ATGs).In this study, we investigated the possible impact of two Barley yellow striate mosaic virus (BYSMV) proteins, i.e., phosphoprotein (P) and ancillary protein 3 (P3), on four important genes involved in autophagy (ATG2, ATG6, ATG7, and AGO1) in N. benthamiana. P and P3 genes were cloned in pCAMBIA-1302 vector under the control of the 2 × 35S promoter and Hemagglutinin tag. Constructs of each gene were agroinfiltrated in the abaxial side of the N. benthamiana leaves. Five days after agroinfiltration, the expression level of these genes was measured using RT- qPCR. The results showed that expression of ATG2, ATG6 and ATG7 genes increased in all treatments (P, P3, P+P3).The level of ATG2 expression was 5.57, 15.6 and 5.6 fold, in P/GFP, P3/GFP and P/P3/GFP treatments, respectively, while a 1.5-fold reduction was obtained in expression of AGO1 in all treatments. These results implied that P and P3 proteins of BYSMV can modify the expression of autophagy related genes in N. benthamiana plant. These findings suggest the involvement of AGO1, ATG6, ATG7 and ATG2 in immune responses of N. benthamiana against BYSMV, which provide a better understanding of plant host defense mechanisms against virus infections and might be an opportunity to exploit a novel antivirus approach.
