ارتباط بين بيان پروتئين PAWP اسپرم با ميزان لقاح در افراد نابارور كانديد ICSI

Relationship between Expression of Sperm PAWP Protein with Fertilization Rate in Infertile Men Candidate for ICSI Technique

سابقه و هدف: پروتئين متصل به دمين WW غلاف خلف آكروزومي (PAWP)، يكي از پروتئين­هايي است كه در فرايند اسپرماتوژنز بيان ميشود و نقش­هاي گوناگوني در تمايز اسپرم، لقاح و تكوين اوليه جنين دارد. هدف اين مطالعه تعيين ارتباط بين بيان PAWP با ميزان لقاح در مردان نابارور كانديد تزريق درون سيتوپلاسمي اسپرم (ICSI) بود. به­علاوه فراگمنتاسيون DNA اسپرم نيز در اين مردان نابارور ارزيابي شد. مواد و روش­ها: در اين مطالعه توصيفي، نمونه مايع مني از 54 مرد ناباروركانديد ICSI كه در سن 44/4±5/32 به مركز باروري و ناباروري اصفهان مراجعه كرده بودند، جمع­آوري شد. پارامترهاي اسپرمي، فراگمنتاسيون DNA، بيان PAWP درسطح RNA و پروتئين به ترتيب توسط آناليز كامپيوتري مايع مني، آزمون تانل، واكنش زنجيرهاي پليمراز همزمان و وسترن­بلات انجام شد. داده­ها توسط نرم افزارSPSS.16 با استفاده از آناليز آماري independent t-test و Pearson correlation بررسي شد و p-value كمتر از 05/0 از لحاظ آماري معني دار در نظر گرفته شد. يافته­ها: مردان نابارور بر اساس ميزان لقاح كمتر و بيشتر از 50% دسته­بندي شدند. در مردان با لقاح كمتر از 50%، بيان PAWP به­طور معني­داري كمتر و درصد فراگمنتاسيون DNA اسپرم به­طور معني­داري بيشتر بود (P ) . ارتباط معني داري بين بيان PAWP در سطح RNA و پروتئين با ميزان لقاح مشاهده شد. نتيجه­گيري: بيان نرمال ژن و پروتئين PAWP اسپرم و درصد پايين فراگمنتاسيون DNA اسپرم در مردان نابارور مي تواند نشانگري از ميزان موفقيت لقاح پس از ICSI باشد.

Backgroundm: Post-acrosomal sheath WW domain binding protein (PAWP) is one of the proteins that is expressed during spermatogenesis process and has several roles in sperm differentiation, fertilization, and early embryonic development. The aim of this study was assessment of the relationship between PAWP expression with fertilization rate in infertile men candidate for intracytoplasmic sperm injection (ICSI). In addition, sperm DNA fragmentation was also assessed in these infertile men. Materials and method: In this descriptive study, semen samples were collected from 54 infertile men, of aged 32.5±4.44 candidate for ICSI referring to Isfahan Fertility and Infertility Center. Sperm parameters, DNA fragmentation, expression of PAWP at RNA, and protein level were assessed by Computer Assisted Semen Analysis, TUNEL assay, real time PCR, and western blot, respectively. Data was analyzed by SPSS (version 16) using Independent t-test and Pearson Correlation. P-values <0.05 were considered statistically significant. Resultst: Significant correlations were observed between expression of PAWP at RNA and protein level with fertilization rate. When infertile men were categorized according to the percentage of fertilization lower and higher than 50%, the expression of PAWP was significantly lower and percentage of DNA fragmentation was significantly higher In the first group,in infertile men with fertilization rate lower than 50% compared to with the other group. (p<0.05). Conclusion: Normal expression of sperm PAWP at gene and protein levels, and also low percentage of sperm DNA fragmentation may be considered as normal spermatogenesis processes in men.